三种食用菌的活性物质分析及抗氧化、抗肿瘤等功能研究

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本研究首先利用茶薪菇、草菇两种食用菌做材料,通过液体摇瓶培养技术获得了这两种食用菌的培养液和菌丝体。利用不同极性的有机溶剂分别对茶薪菇、草菇的培养液和菌丝体进行抽提,获得了极性与来源均不同的活性物质提取物。随后,对获得的活性物质提取物的组分及功能进行了研究。另外,以滑菇子实体做材料,获得了滑菇粘液,对滑菇粘液的成分及功能进行研究。具体研究结果如下:1、用实验室和生产中常见的几种物质做为碳源、氮源、无机盐和维生素,以菌丝体干重为指标,采用液体摇瓶培养的方法通过单因素实验和正交实验,筛选得到了茶薪菇和草菇的最适液体培养基,茶薪菇液体培养基组成为:葡萄糖1.5%、麦芽糖2%、黄豆粉0.15%、酵母粉0.15%、KH2PO4 3%、MgSO4·7H2O 0.15%、VB1 0.01%和FeSO4·7H2O 0.001%;草菇液体培养基组成:葡萄糖2.5%、可溶性淀粉2.5%、蛋白胨0.2%、黄豆粉1.5%、KH2PO4 0.3%、MgSO4·7H2O 0.05%、VB1 0.005%和FeSO4·7H2O 0.002%。2、通过显色反应和分光光度法对茶薪菇和草菇各提取物进行了定性定量分析,结果显示:茶薪菇各提取物中不含黄酮类物质,但含有粗三萜,其中菌丝体的乙酸乙酯相中粗三萜含量最高,达17.49%。草菇各提取物中既含有黄酮类物质又含有粗三萜,其中菌丝体石油醚相提取物中总黄酮的含量最高,为9.31%;菌丝体乙酸乙酯相提取物中粗三萜含量最高,为17.00%。统计表明,两种食用菌的菌丝体中粗三萜含量要显著高于培养液。草菇总黄酮的含量则与提取溶剂的极性有关,乙酸乙酯相中的总黄酮含量显著高于石油醚相和乙醇相。3、采用体外DPPH·实验、小鼠肝脂质过氧化实验对茶薪菇和草菇各提取物的抗氧化活性进行了检测,结果表明两种菌的各提取物均具有很强的抗氧化活性。在茶薪菇各提取物中,乙酸乙酯相提取物在两实验中的抑制率均最高,分别为98.80%和96.41%;草菇各提取物中乙酸乙酯相提取物的活性也是最强的,抑制率分别为97.42%和85.34%。4、用MTT法测定各提取物对癌细胞增殖的影响结果表明:茶薪菇和草菇各提取物均具有抑制癌细胞增殖的作用,并且抑制率和提取物的浓度呈线性关系。在茶薪菇各相中,培养液的石油醚相抑制癌细胞的活性最强,抑制率为91.94%;在草菇各提取物中,培养液的乙酸乙酯相对癌细胞有最高的抑制率,为94.80%。5、滑菇粘液定性、定量检测结果显示:在滑菇粘液中含有糖、蛋白质和脱氧核糖核酸(DNA)等物质,含量分别为2.231%、0.209%、1.315%;滑菇粘液对人k562癌细胞的抑制作用实验表明,滑菇粘液能有效抑制癌细胞k562的增殖,当400μg/mL的滑菇粘液作用细胞120 h时,对癌细胞的抑制率最大,为56.7%,IC50为302.8μg/mL。滑菇粘液对小鼠静止脾淋巴细胞或激活型淋巴细胞(加刀豆素A)的增殖作用实验表明,滑菇粘液对两种淋巴细胞有刺激生长作用,并且刺激指数与滑菇粘液浓度呈正相关关系;在浓度为400μg/mL时,对两种细胞的刺激指数分别为1.8720和1.2198,说明滑菇粘液具有较好的免疫促进作用。
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