【摘 要】
：
目的:对大理地区HIV相关的非结核分枝杆菌(non-tuberculous mycobacteria,NTM)临床分离株进行菌种鉴定;对大理地区HIV相关的鸟分枝杆菌(Mycobacterium avium,MAV)用MLVA(Multi locus variable-number tandemrepeat analysis)法进行基因分型,探讨优势菌群基因型特征以及流行趋势;通过比例法检测MAV
论文部分内容阅读
目的:对大理地区HIV相关的非结核分枝杆菌(non-tuberculous mycobacteria,NTM)临床分离株进行菌种鉴定;对大理地区HIV相关的鸟分枝杆菌(Mycobacterium avium,MAV)用MLVA(Multi locus variable-number tandemrepeat analysis)法进行基因分型,探讨优势菌群基因型特征以及流行趋势;通过比例法检测MAV的药物敏感性,探讨HIV相关的鸟分枝杆菌耐药现状;探究MAV中的毒力蛋白PPE25-MAV对巨噬细胞凋亡的影响。方法:1、NTM的菌种鉴定:用对硝基苯甲酸(PNB)和噻吩-2-羧酸肼(TCH)鉴别培养基对分枝杆菌进行初步鉴定。设计16Sr RNA、hsp65和rpo B基因的引物,以初步鉴定的分枝杆菌DNA为模板进行PCR扩增,将扩增结果测序后提交至NCBI中,与Gen Bank中的标准序列进行BLAST比对,然后进行同源性分析。2、MAV的基因分型:鉴定后的大理地区HIV相关MAV菌株,选取15个数目可变串联重复序列(VNTR)特异位点,运用聚合酶链反应(PCR)和琼脂糖凝胶电泳技术初步建立检测大理地区HIV相关MAV菌株DNA指纹图谱方法。运用Quantity One和Bio Numerics(6.6)软件对结果进行数字化处理,采用UPGMA法和MST法进行聚类分析。3、对MAV的药物敏感性:采用比例法对所有MAV菌株进行包括左氧氟沙星(LFX)、阿米卡星(AK)、卷曲霉素(CPM)、丙硫异烟胺(TH1321)、利福布丁(RBU)、莫西沙星(MFX)在内的这6种药物进行药敏试验。4、PPE25-MAV诱导巨噬细胞凋亡:克隆表达和纯化PPE25-MAV蛋白,分别用浓度为0.5μg/m L、1μg/m L、2μg/m L、5μg/m L的蛋白处理巨噬细胞,各处理2h和10h后,使用流式细胞技术检测巨噬细胞凋亡率。结果:1、NTM的菌种鉴定:大理地区HIV相关的12株NTM中,慢生长分枝杆菌11株,其中9株鸟分枝杆菌,1株帕拉分枝杆菌,1株戈登分枝杆菌;快生长分枝杆菌1株为脓肿分枝杆菌。主要以鸟分枝杆菌为优势菌群。2、MAV的基因分型:VNTR的15个位点的HGDI值存在差异,最高值为0.75,最低值为0。在15个位点中MATR-14最高为0.75,而MATR-9、MATR-1、MATR-2等13个位点HGDI值均大于等于0.5。根据UPGMA法聚类分析树状图显示,大理地区双感的9株鸟分枝杆菌分为3个基因群,8个基因型。其中C群的2个临床分离株形成1个簇,A、B群没有成簇的菌株。用MST法聚类分析的结果大理地区的鸟分枝杆菌分为三个簇。3、对MAV的药物敏感性:9株HIV相关的MAV全部对阿米卡星(AK)耐药,有7株对左氧氟沙星(LFX)耐药,有6株对莫西沙星(MFX)耐药,有5株对卷曲霉素(CPM)耐药,有1株对利福布丁(RBU)耐药,另外9株MAV均对丙硫异烟胺(TH1321)敏感。4、PPE25-MAV诱导巨噬细胞凋亡:在作用2h后,与空白对照组相比,细胞的晚期凋亡率和总凋亡率在0.5μg/m L与1μg/m L时均低于空白组(P<0.05);在作用10h后,与空白对照组相比,细胞的早期凋亡率仅5μg/m L时略有升高(P<0.05),在0.5μg/m L、1μg/m L和2μg/m L之间差异无统计学意义(P>0.05),细胞晚期凋亡率和总凋亡率在2μg/m L和5μg/m L时明显降低(P<0.05)。结论:1、大理地区HIV相关的12株NTM中主要优势菌群为鸟分枝杆菌,rpo B和hsp65基因可以将脓肿分枝杆菌的亚种鉴别出来。2、对大理地区MAV菌株MATR-VNTR分析,不同菌株的同一位点的基因片段差异明显,基因分型多态性较高。MATR-14和MATR-9等13个位点分辨力高,可作为大理地区HIV相关MAV的基因分型首选位点。3、MAV对丙硫异烟胺(TH1321)敏感,同时存在对二线抗结核药物耐药的情况以及多药耐药的特点。4、PPE25-MAV蛋白对巨噬细胞凋亡有抑制作用。而且PPE25-MAV蛋白主要作用于巨噬细胞的晚期凋亡阶段。
其他文献
目的分析艾滋病相关弥漫大B细胞淋巴瘤患者CHOP21/R-CHOP21治疗过程中EB病毒、血液细胞学、生物化学和免疫学等实验室指标的变化情况,研究各指标与AIDS-DLBCL患者预后的关系,为艾滋病相关弥漫大B细胞淋巴瘤患者的诊疗提供科学依据。方法本研究采用双向研究方法,以云南省传染病医院2014年1月-2019年6月收治的艾滋病相关弥漫大B细胞淋巴瘤患者为研究对象,根据是否感染EB病毒分为EBV
随着近年中国企业和国外公司石油天然气领域合资项目不断增多,我国对石油天然气领域工程文本的翻译需求也越来越大。本报告以作者参加川东北高含硫天然气封弃井项目中的一项翻译任务《坡1x2井封弃井作业程序终审版》为案例,旨在探讨石油天然气领域工程文本的英译汉问题。源文本为封弃井项目的作业程序文件,属于工程文本,具有客观、专业、逻辑性强等特点,其目标读者为现场中国工人。翻译时,译文既要客观、准确地传达原文的内
作为新的安全技术,物理层密钥的研究旨在保证无线通信的安全,其核心思想是通信双方基于无线信道特征生成高速一致的安全密钥。无线信道具有的特征包括时变性,互易性和空间唯一性。相对传统的加密方法,物理层密钥生成技术不需要进行密钥的分发与管理,能够达到香农保密通信理论中的绝对安全。物理层密钥生成技术具体分为五个阶段,分别是信道探测,预处理,量化,信息调和与保密增强。本文将研究重点聚焦在前三个阶段,主要的研究
生物发光成像技术以其非侵入特性,广泛应用于在体肿瘤进展和药物作用下的生理活动的实时监测,是药物筛选及药效评价的新型工具。Britanin是一类从旋覆花属植物中发现的具有离体抗炎活性的伪愈创木烷型倍半萜内酯。本课题构建了针对胃癌荷瘤鼠模型,基于荧光素酶底物的生物发光成像药物筛选平台,研究了天然产物Britanin对肿瘤的在体作用和代谢信息,并对药物分子的剂型加以修饰,通过搭载纳米药物载体以获得高生物
目的:细胞色素酶P450(Cytochrome P450,CYP)作为一种非常重要的催化剂在人体代谢过程中占据极为重要的地位,它能够参与包括羟基化反应在内的多种代谢过程,是药物药代动力学和反应变异性的主要来源。人类中的CYP酶依据序列的相似性分类。细胞色素酶P450 4(Cytochrome P450,CYP 4)家族是人类第二大CYP家族,除CYP 4F8、CYP 4F12、CYP 4X1和CY
绿肥作为我国传统农业的重要作物之一,其具有改土肥田、减少水土流失、防治病虫害及提高作物产量等多方面作用。毛苕子作为一种典型豆科绿肥,其种植面积逐年提升,目前国内主要以人工收获为主,机械化水平发展较低,限制农民大面积种植积极性。针对毛苕子植株在成熟期的生长状态及力学特性,设计了一种毛苕子收获机喂入装置。本文综合力学特性试验、关键部件设计分析、数值模拟仿真、多目标优化及田间性能试验等方法及手段,确定了
对于一个文档集合,能够从无到有的理解其内容并不是一件很容易的事情,尤其是专业性较强的文档,比如学术论文。而理解一个集合却有着重要的作用,比如,可以通过一个集合了解一个领域的研究内容,或者可以借此过程将集合分类整理。因此,一个能够辅助人们对一个文档集合进行理解的工具便能够起到很大的作用。为了满足这个需求,本文设计了一个可视化的方法,辅以数据挖掘的手段,使其拥有帮助使用者更快更好的理解一个文档集合的能
随着人们经济收入提高,对生活品质和健康更加关注。城市住宅提档升级,绿化空间的增大,庭院绿化越来越受到居民推崇。可食景观兼具食用和绿化效果,生态、绿化、经济效益明显。为了系统科学城市庭院中的可食景观,本文以北碚区8个高档社区的庭院的为例,采用文献综述法、问卷调查、实地走访、理论设计和案列规划等,对城市庭院可食景观进行了较为全面的研究。主要获得如下结果:(1)从可食景观植物在城市庭院应用线上调查问卷结
近年来,锂离子电池(LIBs)因其具有高能量密度、长循环寿命、低自放电率、无记忆效应、环保等优点,已被广泛应用于移动电子设备、电动汽车和能源储存系统等领域。传统的锂离子电池主要有四个部分组成:正极、负极、隔膜、电解液。其中,隔膜作为一个关键的组成部分,用来阻止电池内部短路,同时在充放电循环过程中为锂离子提供传输通道。因此,隔膜的性能对电池性能来说是至关重要的。传统的聚烯烃类隔膜具有出色的机械性能、
移动自组织网络被认为是未来无线通信网络的重要发展趋势之一。近年来,伴随终端直通和万物互联概念的提出,移动自组织网络在不同应用场景大规模部署。由于无线自组织网络的拓扑变化快速、节点资源少、传统广播寻路方式开销大等特点,保证网络节点正常高效地进行数据交互,是移动自组网络研究的挑战。在数据传输过程中,路由协议发挥着重要作用。分析现有路由协议存在的问题,找到相对稳定的路径完成数据的共享与传输能够减少路由发