论文部分内容阅读
目的:原发的成人脑肿瘤中胶质瘤是最常见的类型。它侵袭性强,与周围组织界限不清晰。因此,常规的治疗手段如手术治疗和放射治疗对它作用都很有限。不但如此,胶质瘤的耐药性也导致其化学治疗收获甚微。因此,胶质瘤患者需要更有效的治疗方案,而这些治疗方案的建立需要我们找到新的分子靶点。核黄素转运基因2(RFT2)是SLC52家族的一员,它在核黄素的代谢中起着重要的作用。最近,一些研究已经证实,RFT2在许多人类肿瘤(食管鳞状细胞癌、胃癌、宫颈癌)的发生发展中十分重要。本研究旨在探究RFT2在人类胶质瘤中的表达情况及其对胶质瘤细胞生物学特性的作用,进而为胶质瘤的分子治疗提供新的靶点。方法:为了检测RFT2在正常脑组织和人类脑胶质瘤组织中的表达水平,我们对120例不同级别的胶质瘤组织、24例正常脑组织进行了免疫组织化学染色。利用RFT2-siRNA-3抑制胶质瘤细胞系LN308和LN229中RFT2的表达。使用MTT、平板克隆形成实验、流式细胞术、Transwell实验、Western blot和裸鼠皮下荷瘤模型从体内和体外两方面来进行胶质瘤细胞增殖、迁移、侵袭等表型的实验评估。结果:1、与正常脑组织相比RFT2在胶质瘤组织中是高表达的。而且,胶质瘤中RFT2的表达水平与WHO分级呈正相关。2、与对照组和无义序列转染组相比,敲低LN308和LN229细胞RFT2的表达后细胞增殖被明显抑制(P<0.01),细胞集落形成率明显下降(P<0.01)。敲低RFT2可有效抑制移植瘤的体内生长(P<0.001)。3、敲低RFT2后LN308和LN229细胞阻滞在G1/G0期(P<0.05)。在LN308和LN229细胞中敲低RFT2可以明显升高其凋亡细胞的比例(P<0.05)。各组中细胞周期和凋亡相关调节蛋白(p21、p27、Bcl-2、Bax)的表达都明显改变。4、敲低RFT2后LN308和LN229细胞的迁移和侵袭能力受到抑制,其相关调节蛋白MMP-2和MMP-9的表达水平也相应下降。结论:本研究发现,胶质瘤组织中RFT2呈高表达,它的表达水平与胶质瘤WHO分级呈正相关。敲低RFT2促进了LN308和LN229细胞的细胞周期阻滞、细胞凋亡,抑制了细胞增殖、迁移和侵袭的能力。不但如此,裸鼠荷瘤模型也进一步更好地证明了敲低RFT2后胶质瘤细胞的增殖受到抑制。这些结果提示,RFT2可以成为胶质瘤分子治疗的新靶点。