Toll样受体9及其信号传导通路基因多态性与HBV感染结局的相关性研究

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【目的】Toll样受体是天然免疫识别的主要受体,具有连接天然免疫和获得性免疫的桥梁作用。TLR9信号传导通路的激活可以诱导大量细胞因子的产生,在抗HBV感染中发挥重要作用。TLR9及其信号传导通路的基因多态性是否与慢性乙型病毒性肝炎的临床转归相关,国内外的研究报道较少。本研究通过对不同组别TLR9及其下游基因MyD88的SNPs进行分型和统计分析,初步探讨Toll样受体9及其信号传导通路的基因多态性与HBV感染结局的相关性。【方法】收集病毒性肝炎慢性乙型慢加急/亚急性肝衰竭患者103例、慢性乙型肝炎(CHB)患者156例、HBV感染自发清除者151例,运用NCBI数据库中中国人群的数据,选择候选基因TLR9启动子区的3个SNPs位点rs352144(A/C)、rs187084(T/C)、rs5743836(T/C)以及MyD88基因3’UTR的SNPs rs7744(A/G)、rs6853(A/G),利用PrimerPremier5和vector NTI 10软件设计所选SNPs的PCR引物;采用DNA抽提试剂盒提取外周血人类基因组DNA,应用实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative Polymerase chain reaction, real-time PCR)方法进行SNPs分型,比较组间基因型和等位基因频率差异。【结果】1、研究发现TLR9基因rs352144(A→C)位点AC基因型在CHB组的频率显著低于自发清除组,两组的基因型频率(3.8% VS 11.3%)和等位基因频率(1.9% VS 5.6%)相比,均存在统计学意义(P<0.05), OR值为3.042,95%可信区间为1.183-7.824,但在肝衰竭组与自发清除组间基因型频率和等位基因频率分布没有统计学差异(P>0.05),OR值为1.306,95%可信区间为0.57-2.989;肝衰竭组、CHB组分别与HBV感染自发清除组相比,TLR9基因rs187084(T→C)位点的基因型和等位基因频率分布没有统计学差异(P>0.05),OR值分别为1.175、1.114,95%可信区间分别为0.816-1.692、0.806-1.541;rs5743836(T→C)位点的基因型和等位基因频率在肝衰竭组与HBV感染自发清除组、CHB组与HBV感染自发清除组中的分布也无统计学差异(P>0.05),OR值分别为0.68、1.007,95%可信区间分别为0.095-4.866、0.997-1.106; 2、研究发现MyD88基因rs7744(A→G)位点GG基因型在肝衰竭组的分布频率(45.6%)显著高于自发清除组(21.2%),差异有统计学意义(P<0.01),OR值为0.555,95%可信区间为0.388-0.794,但在CHB组与自发清除组间基因型和等位基因的分布频率却无显著的统计学差异(P>0.05),OR值为0.891,95%可信区间为0.647-1.227;肝衰竭组、CHB组分别与HBV感染自发清除组相比,MyD88基因rs6853(A→G)位点的基因型和等位基因频率分布没有统计学差异(P>0.05),OR值分别为1.617、0.722,95%可信区间分别为0.413-6.326、0.271-1.921。【结论】1、TLR9基因rs352144(A→C)位点AC基因型与HBV感染的自发清除存在相关性,但与感染的慢性化和重症化无明显相关;TLR9基因rs187084(T→C)、rs5743836(T→C)位点的多态性与HBV感染结局之间没有相关性; 2、MyD88基因rs7744(A→G)位点的多态性与肝衰竭的发病存在相关性,携带基因型GG者更容易进展成肝衰竭;rs6853(A→G)位点的基因多态性与HBV感染结局之间没有相关性。
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