BRAFV600E基因突变与NIS启动子甲基化在甲状腺乳头状癌中的研究

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目的:研究甲状腺乳头状癌(PTC)中BRAFV600E基因突变阳性表达与甲状腺钠/碘同向转运体(MS)启动子甲基化之间的联系,为临床治疗甲状腺癌提供理论依据。方法:1,实验对象:收集2012年1月至2012年12月中南大学湘雅三医院病理科石蜡切片标本共74例,按实验要求分为:实验组55例(甲状腺乳头状癌组织),正常组19例(甲状腺腺瘤旁正常组织)。2,实验方法:(1)提取石蜡组织标本DNA;(2)运用PCR技术对BRAFV600E基因进行目的基因扩增,琼脂糖凝胶电泳检测,所得阳性条带直接测序,以此研究BRAFV600E基因突变在甲状腺乳头状癌标本中分布情况;(3)在所测BRAFV600E基因突变阳性标本中运用甲基化特异性PCR (MSP)技术对其DNA进行NIS启动子目的基因扩增,琼脂糖凝胶电泳检测,所得阳性条带直接测序,以此研究NIS启动子甲基化在BRAFV600E突变阳性标本中的分布情况,并分析BRAFV600E基因突变与NIS启动子甲基化在甲状腺乳头状癌中的联系。结果:1、在55例甲状腺乳头状癌标本中检出35例标本呈现BRAFV600E突变阳性表达(63.64%),BRAFV600E突变呈阴性结果的有20例(36.36%),19例正常组中无BRAFV600E基因突变检出,将数据运用SPSS21.0统计软件分析,两者组间存在统计学差异,(P<0.01);2、在BRAFV600E基因突变阳性表达的35例标本中共检出NIS基因启动子甲基化阳性表达7例(20%),在所有74例实验对象余下的39例标本中均未检出NIS基因启动子甲基化阳性表达,其NIS基因启动子甲基化检出情况经SPSS21.0统计软件分析,结果显示无统计学差异,(P>0.05);3、BRAFV600E基因突变及NIS基因启动子甲基化与患者相关临床资料之间进行统计分析,发现二者均与淋巴结转移存在联系,而与其他相关临床数据无明显关联;4、将BRAFV600E基因突变检出情况数据同NIS基因启动子甲基化检出情况数据运用四格表确切概率法进行统计学分析得出,两者之间存在统计学差异,(x2=0,P<0.01)。结论:1、BRAFV600E基因突变在PTC中的检测率较高,且在有淋巴结转移的患者中检出率较高;2、NIS启动子甲基化在PTC中的检测率低,但在有淋巴结转移的患者中检出率相对较高;3、BRAFV600E基因突变与NIS启动子甲基化之间存在一定联系。图3幅,表5个,参考文献28篇
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