近年来，恶性肿瘤发病率日益增高，已成为威胁人类健康的第二大疾病。对恶性肿瘤进行化学治疗，其目的是最大限度的杀伤肿瘤细胞。然而，由于多药耐药的存在，常常导致化疗失败，严重影响肿瘤患者的生存。因此在临床诊断耐药患者鉴定出耐药表型，从而针对耐药相关靶标寻找开发高效低毒的抗耐药肿瘤逆转剂成为肿瘤治疗亟待解决的问题。目前对肿瘤耐药相关基因的研究主要集中在膜转运蛋白介导的耐药机制，ABC超家族的成员：P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白(MRP)和乳腺癌耐药相关蛋白(BCRP)已被证明能够在肿瘤细胞系中对多种抗肿瘤药物产生外排作用导致耐药。其中P-gp是目前研究得最为广泛和深入的耐药机制，也是主要在临床实践得到证实的耐药蛋白，目前合成的耐药逆转剂均以P-gp为靶点，因此导致耐药肿瘤的临床治疗受到限制。与此同时虽然P-gp水平升高是耐药调节的重要机制，但并不是唯一的耐药机制，许多药物性耐药的肿瘤细胞并没有P-gp的过度表达。大量研究也证明耐药是多种机制共同作用的结果，因此探索多药耐药可能的新的分子机制，寻找参与多药耐药机制的新相关基因，可为合成和开发新的耐药逆转剂和抗耐药肿瘤新药提供基础，为耐药肿瘤的临床研究提供新靶点。本文的第一部分利用cDNA array等技术筛选出几个可能的耐药相关新基因，运用RNA干扰等技术研究其中的ERGIC-53基因在肿瘤耐药细胞系中的表达及可能参与的耐药机制，并检测它在血液病临床病例中的表达，为临床耐药肿瘤诊断及治疗提供新靶点。第二部分克隆表达了hTNF-α并研究了它对耐药肿瘤细胞的逆转作用。 1．多药耐药相关基因的研究 我们用含有1，176个基因的cDNA Microarray对K562和它的耐药细胞株K562／A02细胞mRNA进行了差示分析，通过比较这两种细胞的mRNA，发现12个基因表达有明显差异，5个基因在K562／A02中表达明显增高而另7个表达降低。并就5个表达增高基因中的ERGIC-53基因进行进一步研究。 ERGIC-53基因是内质网高尔基体中间室的标志，是一个非糖基化的Ⅰ型