目的：探讨拟缺血性损伤对大鼠脑微血管内皮细胞（Rat Brain MicrovascularEndothelial Cells，rBMECs）上P-糖蛋白（P-glycoprotein，P-gp）的影响及其相关机制。方法：原代培养rBMECs、神经元和神经胶质细胞并借助Transwell建立共培养体系；在共培养体系的基础上用Na2S2O4（终浓度为2mM）建立损伤模型,损伤时间为4h。在共培养体系内室、外室加入肿瘤坏死因子（Tumor necrosis factor-α，TNF-α）、一氧化氮合酶（Nitric-oxide synthase，NOS）、蛋白激酶C（Protein kinase C，PKC）的抑制剂H398、L-NMMA(NG-Monomethyl-L-arginine.monoacetate）、BIM（Bisindolylmaleimide)测定Rh123的表观渗透系数（Apparent Permeability Coefficient，Papp）以反映拟缺血性损伤对rBMECs上P-gp功能的变化；测定外室荧光素钠（Fluorescein Sodium Injection，NaF）的Papp以确保rBMECs紧密连结的完整性；采用Western Blot法确定可能引起P-gp表达和功能变化的因子，然后加入相应的抑制剂测定各因子和P-gp表达变化的情况，研究拟缺血性损伤对rBMECs上P-gp的影响的机制。结果：1.通过Transwell成功建立了rBMECs、神经元和神经胶质细胞的共培养体系。2.以Na2S2O4（终浓度为2mM）诱导rBMECs损伤4h，与空白组比较，损伤组Rh123由内室到外室的Papp值显著降低，由外室到内室的Papp值显著增强，说明P-gp的功能是增强的；NaF的Papp值无显著变化表明rBMECs紧密连结没有受到影响，确保了实验结果的准确性。3.Western Blot结果显示，Na2S2O4（终浓度为2mM）诱导rBMECs损伤4h，TNF-α、NOS和PKC表达均明显增强；H398对TNF-α表达无明显影响但可下调NOS、PKC、P-gp的表达；L-NMMA对TNF-α表达无明显影响但可下调、PKC、P-gp的表达；BIM对TNF-α、NOS的表达无明显影响但可下调P-gp的表达。结论：拟缺血性损伤时，rBMECs受到刺激合成并释放促炎症细胞因子TNF-α，TNF-α继而激活NOS、PKC对rBMECs上P-gp起调控作用且上调其表达，为脑中风药物治疗的研究提供了新的特异性靶点。