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摘要：近年来,生物浸出在浸矿方面取得了重大的进展,并显示出很好的应用前景,尤其是对低品位矿的处理。喜温嗜酸硫杆菌是在40℃-50℃硫化矿浸出中起主要作用的硫氧化细菌,它可以有效促进硫化矿的浸出效率。然而,研究结果和工业应用表明,菌株在频繁传代的过程中会发生突变,浸出能力降低,出现退化现象。因此,菌种资源的保藏工作必不可少。此外,来源不同的浸矿菌虽然同属一个种,但是种间有些菌株在理化特性上有较大的差异且对金属硫化矿物的浸出效果是不一样的,同时在遗传组成方面差异显著,即遗传多样性。本文选用了保护剂聚乙二醇2000、聚乙二醇12000、聚乙二醇20000和甘油对三株喜温嗜酸硫杆菌进行液氮冷冻保藏,并对其最佳的保藏条件进行了探索。实验研究结果表明以30%的PEG2000的保护效果最佳。因此选用30%的PEG2000和30%的甘油作为长期液氮保藏三株喜温嗜酸硫杆菌的保护剂,分别观察保藏半年后、一年后观察菌株的存活、生长以及硫氧化情况。结果表明尽管保藏一年后菌株的存活、生长以及硫氧化情况均有所降低,但是30%的PEG2000保藏的效果明显优于30%的甘油,选用30%的PEG2000作为液氮保藏保护剂,喜温嗜酸硫杆菌至少可以存活一年以上。本文采用16S rDNA序列和16S-23S间隔序列、Rep-PCR、AP-PCR和RAPD技术对分离自中国不同地区的三株喜温嗜酸硫杆菌进行了遗传多样性分析。三株喜温嗜酸硫杆菌的16S rDNA序列和16S-23S间隔序列的相似性分别为99.9%-100%和99.7%-100%。综合Rep-PCR和AP-PCR分析,三株目的菌株具有61.97%～71.64%的相似性。RAPD分析结果表明三株目的菌株具有53.44%～75%的相似性。Rep-PCR、AP-PCR和RAPD技术的分辨率很明显要高于16S rDNA序列和16S-23S间隔序列比对,且可以用于快速辨别菌种遗传多样性。