鲸目动物是一类完全水栖的次生性水生哺乳动物。经过漫长的进化,鲸目动物已演化出完全适应水生生活的运动系统、呼吸系统以及免疫系统等。鲸目动物栖息的生境中存在丰富多样的病原体,其中不仅有来源于水体的病原体,也有陆源的病原体;病原体感染（例如:铜绿假单胞菌等）严重威胁了鲸目动物的个体健康和种群繁衍,因此,鲸目动物的免疫系统成为其适应复杂多变的水生环境、抵御水生环境中的特殊病原体、维持个体健康和保证种群繁衍的重要因素。通过皮肤先天免疫系统识别和抵御病原体侵染是哺乳动物维持机体健康的重要手段。近年来,虽然对人类等陆生哺乳动物相关机制已有深入研究,但对于多变、多压力生存环境下的鲸目动物的先天免疫体系识别和抵御病原体感染的分子作用机制研究仍缺乏。在典型陆生哺乳动物（例如:人类、小鼠和牛等）的机体内,先天免疫系统对铜绿假单胞菌等革兰氏阴性菌的识别与响应主要是依靠Toll样受体4（Toll-like receptor 4,TLR4）。研究表明,TLR4首先识别革兰氏阴性菌的LPS,从而触发下游信号通路激活免疫系统,分泌抗菌肽、细胞因子等效应分子,并通过这些分子的直接作用或募集免疫效应细胞清除病原体。可见,TLR4在先天免疫系统对革兰氏阴性菌的识别与响应中发挥着至关重要的作用。因此,本研究从m RNA水平、蛋白水平、细胞水平和组织水平等多个方面对比研究了印太江豚（Neophocaena Phocaenoides）和人的皮肤成纤维细胞中TLR4的表达情况,深入探讨1)印太江豚皮肤成纤维细胞中TLR4的表达情况;2)脂多糖（LPS）诱导下印太江豚皮肤成纤维细胞TLR4表达情况;3)不同鲸豚的皮肤成纤维细胞中TLR4表达情况。主要研究结果如下:1)通过PCR、RNA荧光原位杂交和免疫荧光实验发现,TLR4仅存在于印太江豚皮肤成纤维细胞的基因组内,在皮肤成纤维细胞的m RNA和蛋白水平上均不表达。2)通过对组织切片进行RNA荧光原位杂交和免疫荧光实验研究不同印太江豚个体的皮肤成纤维细胞是否表达TLR4。结果显示,皮肤成纤维细胞中不表达TLR4这一现象可能普遍存在于不同的印太江豚个体中。3)通过实时荧光定量PCR检测LPS暴露后皮肤成纤维细胞中关键基因m RNA的表达水平。结果显示在人的皮肤成纤维细胞中,LPS刺激能使TLR4、IL6和IL8的表达量上调。然而,LPS暴露对TLR4在印太江豚皮肤成纤维细胞中的表达无影响,但LPS刺激能导致IL6的表达量上调,且铜绿假单胞菌暴露处理后能引起IL6、IL8、TNFα显著上调。可见,在TLR4不表达的情况下,印太江豚皮肤成纤维细胞仍能识别LPS和革兰氏阴性菌并产生免疫响应。总而言之,印太江豚皮肤成纤维细胞并不表达TLR4,但能够响应LPS或铜绿假单胞菌的刺激。一方面,印太江豚皮肤成纤维细胞中可能存在与人类不同的革兰氏阴性菌识别受体以及一种不依赖于TLR4的分子响应机制使印太江豚对LPS和革兰氏阴性菌产生免疫响应;另一方面,印太江豚可能通过识别革兰氏阴性菌的其他组分,例如i E-DAP、胞壁酰二肽、ADP庚糖、鞭毛等,从而识别革兰氏阴性菌。本研究对印太江豚TLR4在皮肤成纤维细胞、皮肤组织和肾上腺组织中的表达情况与人进行了对比研究,揭示了TLR4在印太江豚与人皮肤成纤维细胞中的不同表达模式,然而,对于不同细胞和鲸豚对革兰氏阴性菌的识别机制仍有待开展。