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背景和目的：原发性肝癌主要是肝细胞癌,是一种恶性程度和病死率均较高的临床常见肿瘤,其主要生物学特性是侵袭性强、易复发转移、预后差。目前,手术、放疗、化疗等各种治疗方法由于各自的局限性效果都不甚理想。因此,探索出新的有效的抑制肝癌侵袭转移的方法具有重要的临床意义。端粒酶是目前特异性较高、应用较广的肿瘤标志物之一,端粒酶活性的高低不仅与细胞的增殖有关,而且与恶性肿瘤细胞的侵袭、转移有关。端粒酶如何调节肿瘤细胞的侵袭转移,其机制尚不清楚。因此,以端粒酶为靶点的肿瘤基因治疗成为目前抗癌治疗研究的热点。本研究应用逆转录病毒作为载体,将反义人端粒酶RNA基因导入人肝癌细胞系BEL-7402中,观察肝癌细胞黏附和侵袭能力的变化及与肝癌细胞黏附和侵袭密切相关的蛋白的表达变化,从而探讨反义人端粒酶RNA基因对肝癌细胞系BEL-7402黏附和侵袭的作用及其作用的机制,为临床肝癌的治疗奠定理论基础。方法：前期实验成功构建了携带正、反义人端粒酶RNA基因的真核表达质粒PLXSN-hTR,经电穿孔将质粒导入PT67包装细胞及重组逆转录病毒感染人肝癌细胞系BEL-7402等一系列过程,获得稳定转染目的基因的人肝癌细胞克隆。成功转染正、反义端粒酶RNA基因的肝癌细胞分别为正义转染组(BEL-7402-hTR-EcoRI)和反义转染组(BEL-7402-hTR-BamHI),同时将未做任何处理的肝癌细胞BEL-7402作为空白对照组(BEL-7402)。三组细胞常规体外培养,人工基底膜黏附实验检测细胞黏附能力的变化,体外侵袭实验检测细胞侵袭能力的变化,免疫细胞化学检测不同处理组细胞整合素β1 (integnβ1, INTβ1).上皮型钙黏蛋白(epithelial cadherin, E-cad)的表达水平,明胶酶谱法分析细胞MMP-2和MMP-9的活性变化。结果：1.人工基底膜黏附实验MTT检测结果发现反义转染组、正义转染组、空白对照组细胞的黏附率分别为48.75%、75.73%、79.50%,与空白对照组和正义转染组相比,反义转染组细胞的黏附能力明显减低(P<0.05),正义转染组和空白对照组间黏附力无明显差异(P>0.05)2.体外侵袭实验结果显示反义转染组、正义转染组、空白对照组细胞的穿膜细胞数分别为34.80±3.19、69.87±3.11、71.47士5.15,反义转染组穿膜细胞数明显少于正义转染组和空白对照组(P<0.05),正义转染组和空白对照组穿膜细胞数无明显差异(P>0.05)。3.免疫细胞化学图像分析结果示,反义转染组、正义转染组、空白对照组细E-cad的表达水平分别为：0.2092±0.0196、0.1340±0.0158、0.1244±0.0177,INTβ1的表达水平分别为：0.1533±0.0156、0.3747±0.0144、0.3846±0.0081,与空白对照组和正义转染组相比,反义转染组E-cad的表达水平明显增强,INTβ1的表达水平明显减低(P<0.05),正义转染组与空白对照组相比,两种蛋白的表达均无明显差异(P>0.05)。4.明胶酶谱法结果发现反义转染组细胞上清中MMP-9和MMP-2活性显著低于正义转染组和空白对照组(P<0.05),且各组细胞MMP-2活性表达均较MMP-9高,空白对照组和正义转染组酶谱分析结果无显著差异(P>0.05)。结论：反义端粒酶RNA基因能明显减低肝癌细胞的黏附、侵袭能力,其机制可能是上调E-cad的表达,下调INTβ1的表达,并抑制MMP-2和MMP-9的分泌和活化。