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目的溶血发生时,为避免重新采血对患者的损伤,选用血浆游离血红蛋白浓度来衡量溶血程度标准,采用双波长法测定葡萄糖浓度,并探讨溶血对葡萄糖氧化酶法测定血糖的干扰与纠正方法。方法溶血对于血糖测定的多因素干扰中血红蛋白的影响最为显著,对于血糖测定可以选用血浆游离血红蛋白浓度来衡量溶血程度标准,即溶血后血糖值与血浆游离血红蛋白浓度呈一定关系。选用健康人血液标本,要求无黄疸、无溶血、无脂血。按美国临床和实验室标准研究院(CLSI)文件配制不同浓度的血红蛋白溶液,建立低浓度、中浓度、高浓度三种溶血程度的反应体系,与血浆及葡萄糖校准液按一定比例混合制成溶血样本,在UV-VIS8500紫外／可见分光光度计200nm-650nm波长范围内扫描,得到两条A-λ曲线,进行叠加比较,选择主波长及副波长。使用葡萄糖氧化酶法及双波长法对溶血前和溶血后标本进行测定,可以得到3个参数：不同的溶血程度(x)、葡萄糖的氧化酶法测定浓度(Y)、葡萄糖的真实浓度(z),利用SPSS13.0进行二元一次回归与统计学分析,再比较经回归纠正前后的相对偏差,考察偏差是否在允许范围内。根据美国CL1A’88能力比对检验的葡萄糖分析质量要求的相对偏差在允许范围的士10%以内判断为可接受,比较经回归纠正前后的相对偏差,考察是否在允许范围内。对样本溶血纠正前后的数据进行配对t检验,观察纠正效果。结果溶血样本的葡萄糖测定值较真实值偏低。随着溶血程度的加深,干扰越明显。总的回归方程为Z=0.416+0.054X+1.015Y,相关系数r=0.974(P<0.01)。在经回归纠正前后的相对偏差分别为13.4%、7.7%(P>0.01),纠正后在允许范围(10%)之内。结论溶血对氧化酶法测定葡萄糖的干扰比较复杂,主要有三个方面：①血红蛋白：红细胞破裂后释放的血红蛋白吸收光谱与氧化酶法部分重叠,表现为正干扰。同时,血红蛋白的含铁血红素具有拟过氧化物酶的活性,也能催化酚、4-氨基安替比林(4-AAP)反应,生成红色醌亚胺,表现为正干扰。②谷胱甘肽：红细胞破裂后释放谷胱甘肽可竞争过氧化氢而使测定结果偏低,表现为负干扰。③稀释：红细胞内的葡萄糖浓度比红细胞外约低20%,红细胞破裂后相当于血浆(血清)被稀释,使测定结果偏低,表现为负干扰。溶血对葡萄糖氧化酶法有负干扰,可以通过回归方程进行纠正。