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目的：肿瘤淋巴管生成是肿瘤局部淋巴结浸润和远处转移的必要条件,抑制肿瘤淋巴管生成从而抑制肿瘤淋巴结转移已成为恶性肿瘤治疗的新靶点。碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor, bFGF)是一种肝素依赖性的生长因子,它是重要的促淋巴管生成因子。守宫硫酸糖肽是传统中药守宫抗肿瘤的主要成份,其化学结构与肝素相类似,我们之前的研究表明守宫硫酸糖肽是bFGF的靶向抑制剂。本课题通过守宫硫酸糖肽对肿瘤淋巴管内皮细胞的体外研究,探究守宫硫酸糖肽对肿瘤淋巴管生成的影响及其作用机制。方法：1.取人肿瘤淋巴管内皮细胞(hLECs),设守宫硫酸糖肽高剂量组、守宫硫酸糖肽低剂量组、守宫硫酸糖肽高剂量与bFGF合用组、守宫硫酸糖肽低剂量与bFGF合用组、bFGF组、阴性对照组。通过MTS法检测守宫硫酸糖肽对人淋巴管内皮细胞增殖的影响,并绘制生长曲线。2.分组同前。通过Wound healing和Transwell实验检测守宫硫酸糖肽对人淋巴管内皮细胞迁移的影响。3.分组同前。倒置显微镜下观察守宫硫酸糖肽对人淋巴管内皮细胞形成淋巴管样结构的影响。4.分组同前。通过Western-blot实验检测药物作用后hLECs内Erk、p-Erk表达的情况。结果：1.MTS法计数细胞探究hLECs增殖情况：守宫硫酸糖肽高剂量组及守宫硫酸糖肽低剂量组增殖的细胞数较空白对照组未见明显差异(P>0.05),bFGF组增殖的细胞数较空白对照组明显增多(P<0.05)。而守宫硫酸糖肽高剂量与bFGF合用组、守宫硫酸糖肽低剂量与bFGF合用组增殖的细胞数较bFGF单用组明显减少(P<0.05),其中以守宫硫酸糖肽高剂量与bFGF合用组增殖的细胞数较bFGF单用组减少的更加明显。2.(1) Wound healing实验：从图片细胞迁移的距离来看,守宫硫酸糖肽高剂量组及守宫硫酸糖肽低剂量组细胞迁移的距离较空白对照组未见明显差异(P>0.05),bFGF组较空白对照组有促进细胞迁移的作用(P<0.05)。而守宫硫酸糖肽高剂量与bFGF合用组、守宫硫酸糖肽低剂量与bFGF合用组细胞迁移的距离较bFGF单用组明显减小(P<0.05),其中以守宫硫酸糖肽高剂量与bFGF合用组细胞迁移的距离较bFGF单用组减小的更加明显。(2) Transwell实验：从穿过Transwell小室膜的细胞数来看,守宫硫酸糖肽高剂量组及守宫硫酸糖肽低剂量组较空白对照组未见明显差异(P>0.05), bFGF组较空白对照组明显增多(P<0.05)。而守宫硫酸糖肽高剂量与bFGF合用组、守宫硫酸糖肽低剂量与bFGF合用组较bFGF单用组明显减少(P<0.05),其中以守宫硫酸糖肽高剂量与bFGF合用组较bFGF单用组细胞数减少的更加明显。3.倒置显微镜下观察hLECs形成淋巴管样结构的情况：从hLECs在基质胶上形成的封闭的不规则多边形的数目来看,守宫硫酸糖肽高剂量组及守宫硫酸糖肽低剂量组较空白对照组未见明显差异(P>0.05),bFGF组较空白对照组明显增多(P<0.05)。而守宫硫酸糖肽高剂量与bFGF合用组、守宫硫酸糖肽低剂量与bFGF合用组较bFGF单用组明显减少(p<0.05),其中以守宫硫酸糖肽高剂量与bFGF合用组较bFGF单用组封闭的不规则多边形数目减少的更加明显。4. Western-blot实验检测hLECs内Erk、p-Erk表达：守宫硫酸糖肽高剂量组、守宫硫酸糖肽低剂量组、守宫硫酸糖肽高剂量与bFGF合用组、守宫硫酸糖肽低剂量与bFGF合用组、bFGF组hLECs内Erk的表达较空白对照组均未见明显差异。守宫硫酸糖肽高剂量组及守宫硫酸糖肽低剂量组LECs内p-Erk的表达较空白对照组未见明显差异,bFGF组hLECs内p-Erk的表达较空白对照组明显增多。而守宫硫酸糖肽高剂量与bFGF合用组、守宫硫酸糖肽低剂量与bFGF合用组hLECs内p-Erk的表达较bFGF单用组明显减少。结论：1.守宫硫酸糖肽本身对hLECs的增殖没有影响,但是守宫硫酸糖肽能抑制bFGF诱导的hLECs的增殖。2.守宫硫酸糖肽本身对hLECs的迁移没有影响,但是守宫硫酸糖肽能抑制bFGF诱导的hLECs的迁移。3.守宫硫酸糖肽本身对hLECs淋巴管样结构的形成没有影响,但是守宫硫酸糖肽能减弱bFGF诱导的hLECs淋巴管样结构的形成。4.守宫硫酸糖肽对bFGF诱导的hLECs增殖、迁移、淋巴管样结构形成的抑制作用部分是通过下调hLECs内Erk的磷酸化水平来实现的。5.体外研究证实守宫硫酸糖肽能够通过bFGF抑制肿瘤的淋巴管生成。