纳豆激酶（Nattokinase，NK）是日本传统发酵食品纳豆在发酵过程中由纳豆枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis natto）产生的一种有纤溶活性的丝氨酸蛋白酶。研究表明，NK具有很强的溶解血栓功能，与目前临床所用的尿激酶、链激酶等溶栓药物相比，NK具有安全性好，易被人体吸收，作用直接迅速，药效持续时间长，可由纳豆枯草芽孢杆菌直接发酵生产因而造价低廉等优点。因此许多学者预言，NK将是一种很有潜力的新型溶栓药物。本论文通过对原始菌株进行紫外诱变、纤维蛋白平板初筛、摇瓶发酵复筛的方法筛选出一株高产NK的纳豆枯草芽孢杆菌BSN-3菌株，并对BSN-3菌株所产NK的分离纯化及理化性质等展开了系列研究。通过计算紫外照射芽孢的致死率，确定诱变时间为4min。通过纤维蛋白平板筛选和酪蛋白平板筛选结果的比较，发现酪蛋白平板筛选结果并不可靠。通过单因素实验和正交实验研究了液体发酵产NK的最佳条件。结果表明优化培养基组成为：胰蛋白胨6g／L，木糖30g／L，K₂HPO₄·3H₂O 1g／L，MgSO₄·7H₂O0.2g／L。适宜培养温度为30℃，pH8.0，培养时间72h。在优化条件下，用纤维蛋白平板法测得BSN-3菌株的酶活为1120IU／mL。通过研究BSN-3菌株的生长曲线和产NK时间的关系，研究了BSN-3菌株产NK的产酶动力学，结果表明：NK的合成类型是滞后合成型。BSN-3菌株发酵液4800r／min离心10min，上清液用45％的硫酸铵盐析沉淀部分杂蛋白，离心后，上清液用50％的硫酸铵盐析沉淀NK，再用CM-52层析，得到电泳纯的NK。NK的总收率为39％，提纯倍数为10.3。选用纤维蛋白平板法作为检测NK溶纤活性的方法，进行了一系列的理化性质测定，结果表明：NK水溶液在50℃以下对温度不敏感，可以常温保存。该酶在pH3.0～11.0范围内稳定。不同的金属离子对NK酶活的影响不同，Zn²⁺和Hg²⁺会抑制酶活。低浓度的Cu²⁺不影响酶活，高浓度的Cu²⁺会抑制酶活。不同物质对NK的热稳定性作用不同，其中3‰的明胶对酶的保护作用最好。以上研究结果，可以为NK的生产，为该酶的保藏、运输等提供科学的依据，使NK能尽早开发为溶栓药物。