卡维地洛对大鼠急性心肌梗死后心肌细胞凋亡及凋亡相关基因表达的影响

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目的:评价卡维地洛干预对急性心肌梗死大鼠的心肌细胞凋亡和心室重构的影响。方法:153只雌性Wistar大鼠,随机抽取126只结扎左冠状动脉的前降支(按Weisman等的文献报道的方法)制作急性心肌梗死(AMI)模型;将术后24小时存活的79只大鼠随机的分为假手术组(S组,n=27),心肌梗死对照组(MI组,n=42),卡维地洛(10mg/kg/d)干预组(C组,n=37)。然后根据不同的观察时点随机将各个组分为72小时和5周两个亚组,即S72h组(n=10)和S5w组(n=10),MI72h组(n=12),MI5w组(n=14),C72h组(n=12)和C5w组(n=17)。术后24h直接灌胃法给予卡维地洛干预。采用TUNEL法(末端脱氧核糖核酸转移酶介导的dUTP切口末端标记技术)和DNA凝胶电泳法来检测急性心肌梗死大鼠的心肌细胞的凋亡。采用免疫组织化学方法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3 (caspase-3)、B细胞淋巴瘤-2因子(bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(bax)的表达。分别对各组大鼠进行心脏彩超检查,测量各组大鼠的射血分数(EF)和左室舒张末期内径(LVEDD)。结果:(1)和MI72h组相比,在非梗死区、梗死区、梗死边缘区C72h组的心肌细胞凋亡指数无显著变化(P均>0.05);和MI5w相比,C5w组在梗死区、梗死边缘区的细胞凋亡指数显著降低(P<0.05)。在非梗死区的心肌细胞中,凋亡指数无显著变化(P>0.05)。(2)和MI72h、MI5w组比较,C72h组和C5w组在上述三个部位的心肌细胞内caspase-3的表达均无明显降低,提示卡维地洛干预对急性心肌梗死大鼠的心肌细胞内caspase-3的表达无明显影响。C72h组在梗死区和梗死边缘区心肌细胞内bcl-2的表达明显增加;而在非梗死区的心肌细胞内bcl-2的表达无明显变化。C5w组bcl-2的表达在梗死区、梗死边缘区和非梗死区的细胞内均无明显变化,提示卡维地洛只在干预早期可以明显增加心肌细胞内bcl-2的表达,干预后期作用则不明显。在C72h组和C5w组中,仅C5w组在梗死区的心肌细胞内bax的表达明显降低,bax的表达在其余各部位均无明显降低,提示在大鼠AMI的早期,卡维地洛干预对心肌细胞中bax的表达无明显影响,在AMI的恢复期,卡维地络干预可减少梗死区的心肌细胞内bax的表达。(3)与S72h组大鼠相比,C72h组和MI72h组大鼠EF明显降低,LVEDD无明显变化。与C5w组大鼠相比,MI5w组大鼠EF明显降低,LVEDD明显增大。与S5w组大鼠相比,C5w组大鼠EF明显降低,LVEDD无明显变化。结论:1、大鼠急性心肌梗死后,卡维地洛干预的早期,不能减少梗死区的心肌细胞凋亡;干预5周以后,卡维地洛可减少梗死/疤痕区、梗死边缘区和非梗死区的心肌细胞凋亡。2、卡维地洛干预对心肌细胞中caspase-3的表达无明显影响。3、卡维地洛在干预早期,对梗死区、梗死边缘区心肌细胞内bcl-2的表达可以明显增加;干预5周以后,非梗死区、梗死区、梗死边缘区的心肌细胞内bcl-2的表达无明显增加。4、卡维地洛在干预早期,对梗死区、梗死边缘区和非梗死区bax的表达均无明显减少;干预5周以后,梗死/疤痕区bax的表达明显减少。5、大鼠AMI早期EF就明显降低,但LVEDD没有明显变化,5周后EF进-步降低,LVEDD明显增大。卡维地络干预可以升高EF,减小LVEDD,进而改善大鼠AMI后的心室重构。
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