神经生长因子对体外培养大鼠角膜缘干细胞的作用

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目的:观察神经生长因子(NGF)对体外培养角膜缘干细胞(LSCs)增殖的影响,及其受体在LSCs上的表达与细胞增殖的关系。  方法:体外培养LSCs,分对照组和NGF组传代培养,分别选取各组培养24h、72h和5d的细胞,免疫细胞化学检测p63、TrkA、p75表达,免疫荧光检测PCNA表达,Tunnel法检测细胞凋亡率。相关数据作统计学分析。  结果:①NGF组各时间点p63表达平均灰度值分别为(24h:104.58±1.16;72h:106.72±1.01;5d:108.15±1.05),明显低于对照组(24h:134.80±1.66;72h:123.34±1.58;5d:119.47±1.27),P<0.05,②NGF组各时间点PCNA表达平均荧光强度(24h:66.55±2.10,72h:69.44±2.11,5d:68.67±2.89)高于对照组(24h:61.40±2.05,72h:62.27±1.97,5d:63.50±1.81),P<0.05;③NGF组各时间点TrkA表达平均灰度值(24h:107.87±1.49,72h:108.38±1.81,5d:112.13±1.76)低于对照组(24h:156.15±2.05,72h:129.59±1.97,5d:127.13±1.74),P<0.05;④NGF组各时间点p75表达平均灰度值(24h:83.58±1.22,72h:83.37±1.19,5d:82.02±1.31)低于对照组(24h:88.10±1.67,72h:91.93±1.14,5d:105.95±1.18),P<0.05;⑤凋亡检测,NGF组各时间点细胞凋亡率(24h:12.60±2.20%,72h:13.35±1.76%,5d:13.91±2.95%)低于对照组(24h:14.76±1.41%,72h:18.36±4.79%,5d:21.12±3.62%),P<0.05;⑥Pearson相关分析TrkA表达平均灰度值与p63表达平均灰度值,P<0.05有统计学意义。  结论:NGF可促进和维持LSCs的体外扩增和生长,降低凋亡发生,有维持LSCs的干细胞特性的作用,LSCs可表达NGF受体TrkA和p75,且TrkA的表达与LSCs的增殖有相关性。
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