云杉属树种是中国和世界植物资源中重要的森林树种,有很高的生态价值和经济价值。关于该属树种的核型模式、系统分类和起源进化关系等的研究具有重大的生物学与林学意义。本研究以7种云杉天然林的种子为材料,在常规染色体制片法的基础上,对云杉中期染色体制备技术进行优化并建立了完善的制片体系;采用同源序列法克隆了18S rDNA和25S rDNA基因片段,经序列测定分析后确定其为双色荧光原位杂交的探针,对7种云杉的中期染色体进行基因定位。为各云杉同源染色体识别、近缘种亲缘关系分析和系统发育研究提供了有效的方法。主要研究结果如下:1.优化去壁低渗火焰干燥制片法,筛选出最理想的预处理条件是0.1%秋水仙素(含1%二甲基亚枫)在23℃转速为115 rpm的摇床里暗处理6.5 h;酶解条件是根尖在(2%纤维素酶+1%果胶酶溶液)酶混合溶液中37℃解离70-75 min,得到了分散程度高、形态完好的中期染色体制片,提高了制片效率和质量。2.以沙地云杉基因组DNA为模板,通过PCR法扩增了18S rDNA和25S rDNA基因片段,测序后确定它们的序列分别为1472bp和364bp。经BLAST分析两个克隆序列与GenBank中公布的云杉属部分植物基因的序列同源性达99%,证实了其作为FISH探针的适用性。3.18S rDNA和25S rDNA在沙地云杉和白杄染色体上定位到8个信号位点,确定了这两种云杉的4对同源染色体,在其它5种云杉染色体上定位到6个信号位点,确定了各自的3对同源染色体。为同源染色体的识别和染色体核型分析提供了依据。4.依据7种云杉rDNA-FISH信号的结果,由孟德尔遗传定律初步判断:沙地云杉和白杄聚为一支,亲缘关系近;其它5种云杉聚为一支。