论文部分内容阅读
目的:为了探讨磁性纳米粒子(magneticnanoparticles)和修饰有端粒酶反义寡核苷酸的磁性纳米粒子(magneticnanoparticlesmodifiedwithantisenseoligodeoxynucleotideofhumantelomerase)对HL-60白血病细胞在促进凋亡方面的影响。
方法:用原子力显微镜、荧光显微镜、透射电镜、流式细胞仪等仪器设备检测磁性纳米粒子、修饰有端粒酶反义寡核苷酸的磁性纳米粒子诱导HL-60白血病细胞凋亡的发生；四氮唑蓝比色法、瑞氏染色法、集落形成计数法观察磁性纳米粒子、修饰有端粒酶反义寡核苷酸的磁性纳米粒子对HL-60白血病细胞生长抑制以及细胞增殖的影响；并用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测与凋亡相关的p53基因的表达，荧光量子点进行修饰有端粒酶反义寡核苷酸的磁性纳米粒子在细胞中的定位；在实验过程中，应用Promega公司的mRNA分离器与自行研制的磁性纳米mRNA分离器进行横向比较分离效果。纵横结合阐明本研究应用的磁性纳米粒子在肿瘤细胞诱导凋亡上的生物学应用。
结果:1.磁性纳米粒子、修饰有端粒酶反义寡核苷酸的磁性纳米粒子诱导HL-60细胞发生凋亡，原子力显微镜、光学显微镜、荧光显微镜和透射电镜下均观察到HL-60细胞呈现典型的凋亡细胞的形态变化：细胞核固缩，核内染色质浓缩、凝聚、形成新月形或环状结构紧靠在细胞核膜边缘，并形成凋亡小体。2.磁性纳米粒子、修饰有端粒酶反义寡聚脱氧核苷酸的磁性纳米粒子对HL-60肿瘤细胞的生长和增殖有明显的抑制作用，与对照组相比有显著性差异(p＜0.01)，在剂量为0.8-8μmol/L范围内，抑制率随剂量的增加而增加，当剂量超过8μmol/L时，抑制率反而下降；3.磁性纳米粒子、修饰有端粒酶反义寡聚脱氧核苷酸的磁性纳米粒子可增强p53基因的表达活性，引起DNA降解损伤，反向调节细胞周期活动，促使细胞从G0期进入G1期，抑制肿瘤细胞的生长。4.修饰有端粒酶反义寡聚脱氧核苷酸的量子点能通过内吞作用进入HL-60肿瘤细胞的细胞核，可以在细胞内进行定位和促进HL-60肿瘤细胞的凋亡。
结论:磁性纳米粒子、修饰有端粒酶反义寡聚脱氧核苷酸的磁性纳米粒子通过对促进p53等凋亡基因的表达，抑制HL-60肿瘤细胞的生长和增殖，诱导其发生凋亡。