目的： 　　利用蛋白质组学方法,通过双向电泳分离技术,构建失眠模型大鼠脑组织蛋白质差异表达图谱,寻找针刺提高睡眠质量的相关蛋白,比较各组间蛋白质的表达差异,为探讨针刺治疗失眠的作用机制提供实验依据。 　　方法： 　　1. 选用150只清洁级雄性SD大鼠,随机分为五组,正常饲养1周后,各组大鼠按以下方法进行处理：空白对照组不予任何处理；正常捆绑对照组每日行抓取处理,连续9天；正常针刺治疗组每日行抓取处理,第 3天开始针刺,连续针刺7天；模型对照组每日上午腹腔注射对氯苯丙氨酸混悬液 lml/100g,连续注射2 日,第 3 天开始只抓取,不予针刺,连续抓取 7 天；模型针刺治疗组每日上午腹腔注射对氯苯丙氨酸混悬液 lml/100g,连续注射2日,第3天开始抓取并针刺,连续针刺7天； 　　2.造模结束后将大鼠断头,取出脑组织,分别提取五组大鼠全脑总蛋白,测定其蛋白浓度； 　　3.采用双向电泳技术纯化分离出大鼠脑组织内的蛋白质,然后进行考马斯亮兰染色,扫描凝胶图像并获取蛋白质双向凝胶电泳图谱； 　　4.应用2-DE图谱分析软件“ImageMaster 2D Platinum”对双向凝胶电泳图谱进行分析,寻找出五组间差异表达的蛋白质。 　　结果： 　　1. 获得5组重复性较好的双向电泳图谱； 　　2. 经“ImageMaster 2D Platinum”软件分析,5组凝胶获得的平均蛋白质点数分别为241、295、305、298、294,其平均匹配率分别为70.8%、72.96%、74.23%、81.82%、75.27%,蛋白质在凝胶位置上有很好的重复性； 　　3. 经差异分析空白对照组和正常捆绑对照组共有 21 个差异表达的蛋白质点,空白对照组和正常针刺治疗组之间找到 12个差异表达的蛋白质点,空白对照组和模型对照组共有 14个有差异的蛋白质点,空白对照组和模型针刺治疗组共有16差异表达的蛋白点,正常捆绑对照组和正常针刺治疗组之间找到 9个有差异蛋白质点,正常捆绑对照组和模型对照组之间共有 8个差异表达的蛋白质点,正常捆绑对照组和模型针刺治疗组之间找到17个有差异的蛋白质点,正常针刺治疗组和模型对照组之间找到4个有差异的蛋白质点,正常针刺治疗组和模型针刺治疗组共有 8 个差异表达的蛋白质点,模型对照组和模型针刺治疗组之间共找到 11个有差异的蛋白质点。 　　结论： 　　本研究采用双向电泳技术对大鼠脑组织蛋白质进行研究,建立了稳定性重复性良好的失眠大鼠脑组织蛋白质差异表达的双向凝胶电泳图谱。比较分析后,有一部分蛋白质存在明显的差异表达,说明针刺可以影响脑组织蛋白质的表达变化,提示表达变化的蛋白质可能参与了针刺治疗失眠的过程。在本实验中还应用双向电泳技术的蛋白质组学方法初步了解了不同干预措施后大鼠脑组织蛋白的差异表达,为将来进一步阐明失眠的发病机制,以及针刺治疗失眠的作用机制提供了有益的新线索。