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序言胆管癌是起源于胆管上皮的恶性肿瘤，但由于其特殊的解剖位置，临床症状表现较晚，早期诊断困难。目前，根治性切除虽然是治疗胆管癌的最为有效的外科手段，但是大部分胆管癌在诊断明确时已发生侵袭转移，导致手术切除率低，且手术复发率高，因此探讨胆管癌的侵袭转移机制对提高胆管癌的临床治疗有着重大的意义。研究表明上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）在肿瘤的侵袭与转移中发挥重要作用，并且EMT能够被多种生物分子所调节。其中，微小RNA（microRNAs）是一类非编码、短小的单链RNA，能够在转录后水平调节靶基因的表达影响生物学进程。目前，microRNAs如何调节EMT成为研究的焦点。本课题组在前期研究中发现，微小RNA-21(microRNA-21，miR-21)与EMT标记分子蛋白在胆管癌组织中均与胆管癌侵袭转移存在密切联系，并且两者之间存在相关性。本研究旨在通过体外实验研究miR-21是否通过诱导EMT促进胆管癌的侵袭转移。目的探讨miR-21是否通过诱导上皮间质转化进程促进胆管癌细胞的侵袭转移。方法构建合成无关序列、miR-21mimics和miR-21inhibitor并转染到胆管癌QBC939及RBE细胞中，实验设Cell组（自然生长组）、Cell-NC组（转染无关序列）、Cell-21M组（转染miR-21mimics）及Cell-21I组（转染miR-21inhibitor）。通过实时定量RT-PCR检测miR-21在各组细胞中的表达；运用划痕实验、Transwell侵袭及迁移实验检测各组细胞侵袭力；Real-time PCR、Western blot检测EMT相关分子E-钙粘蛋白（E-cadherin）、N-钙粘蛋白（N-cadherin）及波形蛋白（Vimentin）的mRNA及蛋白的表达。结果在两种胆管癌细胞中，Cell组与Cell-NC组miR-21表达均无明显差异（P>0.05），Cell-21M组较Cell组miR-21表达增高，而Cell-21I组miR-21表达降低，差异具有统计学意义（P<0.05）。划痕实验、Transwell侵袭及迁移实验均提示Cell组与Cell-NC组细胞侵袭迁移能力无明显差异（P>0.05），Cell-21M组细胞侵袭迁移能力增加，Cell-21I组细胞侵袭迁移能力减弱，差异具有统计学意义（P<0.05）。同时，Cell组与Cell-NC组E-cadherin、N-cadherin及Vimentin mRNA及蛋白表达无明显差异（P>0.05），Cell-21M组较Cell组E-cadherin mRNA及蛋白表达均降低，N-cadherin及Vimentin mRNA及蛋白表达增高，Cell-21I组E-cadherinmRNA及蛋白表达增高，N-cadherin及Vimentin mRNA及蛋白表达均降低，差异具有统计学意义（P<0.05）。结论MiR-21能够下调上皮标记分子E-cadherin的表达，上调间质标记分子N-cadherin及Vimentin的表达，从而诱导胆管癌细胞发生上皮间质转化，促进胆管癌细胞的侵袭与转移。