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目的:1.建立一种同时测定血清中9种结合型胆汁酸的固相萃取高效液相色谱紫外检测法(SPE-HPLC-UV)。2.用SPE-HPLC-UV法测定正常孕妇、轻度和重度妊娠肝内胆汁淤积症(ICP)患者母血和脐血中各结合胆汁酸的浓度,建立ICP的特征胆汁酸谱用于ICP的诊断和分度,初步探讨ICP患者母体-胎儿的胆汁酸平衡变化。方法:1.用Chromabond C18 ec固相萃取柱萃取血清样品。2.色谱条件:色谱柱:Waters Nova C18色谱柱(3.9×150 mm,5μm);柱温:25℃;流速:0.8 ml/min;流动相A:60μmol/L磷酸盐缓冲液(pH 3.3),流动相B为纯甲醇(A∶B = 34∶66,v/v);检测波长197 nm;进样量20μl,检测时间20 min。3.用SPE-HPLC-UV法测定16例正常孕妇、11例轻度和14例重度ICP患者母血及脐血结合型胆汁酸。结果:1.9种结合型胆汁酸在20分钟内分离完全,各胆汁酸在浓度为5~500μmol/L范围内线性良好,r为0.9993~0.9998,具有良好的相关性;最低检测限为1.25~3.13μmol/L;该方法日内变异系数在1.47%～5.95%之间,日间变异系数在1.61%～7.92%之间,平均回收率在83.11%~101.34%之间。2.母血:与正常孕妇组的相比:轻度ICP组TCA、TCDCA、TDCA增高有统计学差异;重度ICP组TCA、GCA、GLCA、TCDCA和TDCA增高且有统计学差异。与轻度ICP组相比:重度ICP组TCA、GCA、GLCA、TDCA增高有统计学差异。脐血:与正常孕妇组相比:重度ICP组TCA、GCA和TDCA增高且有统计学差异。与轻度ICP组相比:重度ICP组TCA、GCA、TDCA增高有统计学差异。轻度ICP组的胆汁酸谱与正常孕妇组相比无统计学差异。结论:1.本研究建立的血清胆汁酸的SPE-HPLC-UV分析法能实现母血与脐血中结合型胆汁酸的测定,该方法准确、灵敏、快速、特异,适用于实验室研究和临床常规检测。2.本研究建立了轻度和重度ICP患者母血与脐血中的特征胆汁酸谱,该胆汁酸谱有助于ICP的诊断和分度。3.本研究发现正常孕妇、轻度和重度ICP母血与脐血中胆汁酸水平成正相关,但正常孕妇脐血中总胆汁酸及TCA、GCA含量高于母血,而ICP患者母血中总胆汁酸及TCA含量却高于脐血。这些现象可能是由于胎盘对胆汁酸的转运机制发生改变使母体-胎儿的胆汁酸平衡发生了变化。