胰岛素、格列本脲和二甲双胍对妊娠期糖尿病小鼠的分别干预改善孕鼠产前和产后糖脂代谢失调

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目的妊娠期糖尿病(GDM)的定义为妊娠期间首次发生的葡萄糖耐受不良。GDM对孕妇和后代都有短期和长期影响。目前胰岛素是临床上GDM药物治疗的首选,除此之外,GDM的药物治疗选择十分有限。格列本脲和二甲双胍治疗2型糖尿病效果显著,最近也被临床上用于治疗GDM,但它们在妊娠期间使用所产生的长期影响仍知之甚少。本研究以胰岛素为对照,探讨格列本脲和二甲双胍对GDM孕鼠产前、产后在葡萄糖和脂质代谢方面的影响。方法将8周龄的C57BL/6J雌性小鼠(17-20g)与雄性小鼠(20-24g)以2:1的比例放置在一个笼子里过夜。第二天早晨通过检查阴道粘液栓确认了交配,定义为妊娠日(GD)0。同期成功交配的总数为80,其中64个怀孕雌鼠给予链脲佐菌素(STZ)以产生GDM模型,而剩下的16只怀孕雌鼠作为正常对照组(N)。通过在GD6,GD7和GD8上分别以40mg/kg/day的剂量对每只小鼠进行单次腹腔注射链脲佐菌素(STZ)来建立GDM小鼠模型,以确保获得成功的GDM模型小鼠。在同一时间段,正常对照组小鼠腹腔注射0.9%的生理盐水。当模型组小鼠的空腹血糖浓度超过11.1mmol/l(200mg/dl)时,确认了小鼠的糖尿病状态,即认定GDM小鼠模型成功。造模成功后,除GDM对照组(G)外,其余胰岛素治疗组(GI)、格列本脲治疗组(GG)、二甲双胍治疗组(GM)分别给予长效胰岛素皮下注射,及格列本脲、二甲双胍灌胃干预。自GD0日起,每隔2天测定体重和空腹血糖。在G18日,每组各取8只剖杀取材,另8只孕鼠自然分娩。每周测量一次体重和空腹血糖。产后1周,测定母鼠GTT、ITT并取血。产后5周,测定母鼠GTT、ITT后取血剖杀取材。测定血脂(TC、TG、LDL-C和HDL-C),肝脂(TC、TG)和肝脏中AKT、FoxO1、ACC、ACL、p-AKT、p-FoxO1、p-ACC、p-ACL、G6Pase、PEPCK、SREBP2、HMGCS1等蛋白的水平。结果胰岛素、格列本脲和二甲双胍都可显著改善GDM孕鼠胎盘直径和重量及子鼠死胎数量。相对于胰岛素,格列本脲和二甲双胍对吸收胎并无改善。胰岛素,格列本脲和二甲双胍还可显著改善GDM母鼠的糖耐量、胰岛素抵抗,降低体重、血糖以及血清TC、TG和LDL-C含量,同时显著增加HDL-C水平。母鼠产后1周,这些药物效应(GTT、ITT)仍持续显著存在,但略有减弱;产后5周,这些效应消失,各项指标与GDM对照组相同。此外,与GDM对照组比较,分别用三种药物干预的孕鼠产前肝脏中的p-AKT、p-FoxO1、p-ACC水平增加而G6Pase、PEPCK、SREBP2水平减少。产后5周,三种药物分别干预对上述蛋白水平的影响消失。结论GDM孕鼠在妊娠期分别用胰岛素、格列本脲或二甲双胍干预,可显著改善产前及产后1周葡萄糖耐量,胰岛素抵抗,降低体重和血脂水平,但对母鼠产后5周的长期作用消失。相对于胰岛素干预,二甲双胍可能会引起GDM孕鼠吸收胎数量的增多。
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