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多发性骨髓瘤(multiple myeloma, MM)是恶性浆细胞病中最常见的一种类型,其发病率约为2-3/10万,男女比例为1.6：1,大多患者年龄>40岁.黑人患者是白人的2倍。随着对多发性骨髓瘤发生的生物学机制的深入阐明,新的药物也不断出现,从上世纪六十年代开始经典的MP方案(马法兰+泼尼松),到八十年代的大剂量化疗+自体干细胞移植,再到现在以硼替佐米(万珂,PS-341)为主的化疗方案和雷那度胺等新型药物的出现,治疗效果也有了很大的提高。但药物的毒副作用及肿瘤细胞耐药导致复发仍然是造成治疗失败的重要原因,探索新药和新的联合方案具有提高疗效的可能。表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)是从茶叶中分离得到的儿茶素类单体,是茶多酚生物活性的主要成份。近年来EGCG均药理作用已经得到了国内外一些研究人员的认可,可以用作肿瘤多药耐药性的逆转剂,能够改善癌细胞对化疗的敏感性并减轻对心脏的毒性。有研究显示EGCG能有效抑制MM细胞的生长,但对正常细胞的影响非常小如果EGCG和硼替佐米联用能增加对骨髓瘤细胞的抗肿瘤作用,同时EGCG又保护了正常的细胞,这将是一个非常理想的联合用药。我们选择RPMI8226及U266细胞株作为实验模型进行体外实验,观察EGCG对硼替佐米抗MM细胞作用的影响。目的：体外研究EGCG联合硼替佐米对骨髓瘤细胞株RPMI8226及U266的作用以及可能的机制。方法：1)采用MTT比色法观察EGCG在不同药物浓度及不同作用时间时对硼替佐米抑制RPMI8226及U266细胞株的生长作用的影响。2)采用流式细胞仪分析EGCG作用下细胞周期的变化。3)采用流式细胞仪分析检测EGCG.硼替佐米及两药联合作用下细胞凋亡情况。4) Westen-blot方法检测EGCG、硼替佐米及两药联合作用对RPMI8226细胞c-myc基因表达的影响。5) Westen-blot方法检测EGCG.硼替佐米及两药联合作用对RPMI8226细胞cyclin-D1蛋白表达的影响。6) Westen-blot方法检测EGCG、硼替佐米及两药联合作用对RPMI8226细胞P-catenin蛋白表达的影响。结果：1) EGCG单药对RPMI8226田胞及U266细胞有明显抑制作用。MTT比色法检测结果显示10umoI/L、20umol/L、40umol/LEGCG处理RPMI8226及U266细胞株,作用24、48、72小时能抑制RPMI8226及U266细胞株的生长,其中40umol/L组与其他2组组间差异显著(P<0.05)。2) EGCG可减轻硼替佐米对RPMI8226及U266的生长抑制作用。MTT比色法检测结果显示10umol/L、20umol/L、40umol/LEGCG联合硼替佐米(10-200nmol/L)处理RPMI8226及U266细胞株,作用24、48、72小时能减轻PS-341对RPMI8226及U266的生长抑制作用,各组间差异显著(P<0.05)。在同-EGCG (10umol/L、20umol/L)+硼替佐米(100-200nmoI/L)浓度下,随着作用时间的延长,RPMI8226和U266细胞株的增殖抑制作用增强。在同一EGCG(10umol/L、20umol/L)+硼替佐米(10-50nmol/L)浓度下,随着作用时间的延长,对细胞的增殖抑制作用各组见无显著性差异。同一EGCG (40umol/L)+硼替佐米(10-200nmol/L)浓度下,作用72h与作用24h、48h相比,RPMI8226和U266细胞株的增殖抑制作用逐渐明显,各组间差异性显著(P<0.05)。3)40umol/L EGCG能增强小剂量硼替佐米对RPMI8226及U266的生长抑制作用MTT比色法检测结果显示40umol/L EGCG联合小剂量(20nmol/L以下)硼替佐米处理RPMI8226及U266细胞株72小时能增强硼替佐米对RPMI8226及U266的生长抑制作用,各组间差异显著(P<0.05)。4) EGCG作用下RPMI8226细胞周期无明显变化。5) EGCG能降低硼替佐米作用下RPMI8226细胞凋亡率。EGCG联合PS-341,与单用硼替佐米比较,显示RPMI8226细胞凋亡率明显降低(P<0.05)。6)与单用PS-341相比,EGCG联合硼替佐米作用后,RPMI8226细胞的c-myc基因、cyclin-D1蛋白、β-catenin蛋白表达均上调。小结：1)在体外,EGCG单药对RPMI8226细胞及U266细胞有明显抑制作用。2)在体外,EGCG可减轻大剂量硼替佐米(20nmoI/L以上)对骨髓瘤细胞RPMI8226及U266的生长抑制作用。但在40umol/L浓度,作用72h时能增强小剂量硼替佐米(20nmol/L以下)对RPMI8226及U266的生长抑制作用。3) EGCG作用下RPMI8226细胞周期无明显变化。4) EGCG能降低PS-341作用下RPMI8226细胞凋亡率。5) EGCG联合PS-341作用与单用PS-341相比,RPMI8226细胞的c-myc基因、cyclin-D1蛋白、P-catenin蛋白表达上调。