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目的：在中医理论指导下,分析补肾活血立法治疗骨折的合理性和可行性,并结合文献研究,探讨骨折愈合的影响因素,分析肱骨近端骨折的内外兼治方法,补肾法、活血法及补肾活血法的临床疗效。采用临床研究分析补肾活血法治疗肱骨近端骨折的临床疗效。根据骨折“瘀去、新生、骨合”的愈合进程,与肾主骨的主要理论,结合动物细胞研究深入探讨补肾活血法、活血法及补肾法分别对BMSCs增殖能力的影响,为中医药治疗骨折及相关疾病制订治疗原则及方法提供理论依据。方法：三部分研究：一、文献研究对肱骨近端骨折的治疗方法,尤其是重视内外兼治之法,从血瘀,骨损必伤及肾的理论,分析骨折愈合的影响因素,为骨折治疗提供新思路,结合分析补肾活血法促BMSCs增殖能力、成骨分化的能力,探讨补肾活血立法治疗骨折的合理性。二、补肾活血方治疗肱骨近端骨折的临床研究简单随机选取广州中医药大学附属骨伤科医院住院部及门诊肱骨近端骨折患者59例,按简单随机原则分入治疗组或标准对照组,治疗组予以口服补肾活血方；标准对照组给予口服钙尔奇D600mg,两组疗程均为2周,两组分别予以相同的基础治疗。入院时及服药2周后检测骨代谢指标血清钙、骨钙素及碱性磷酸酶,随访观察骨折愈合时间,第3周视觉模拟疼痛评分及第12周肩关节功能评分。三、实验研究方面(一)细胞的培养、纯化、扩增及鉴定大鼠BMSCs通过离心梯度法进行分离,体外培养及传代,细胞周期采用流式细胞仪测定,选用细胞免疫荧光法鉴定G3代BMSCs表面抗原标记CD34、CD44及CD105。成骨诱导并用Von Kossa法及茜素红染色鉴定,成脂诱导采用油红0染色鉴定。(二)补肾活血方及拆方不同浓度的含药血清对大鼠BMSCs细胞增殖能力的影响将大鼠BMSCs分为补肾活血全方组、活血组、补肾组及空白对照组,并用四组相同浓度(10%)的含药血清培养BMSCs并于第3天采用细胞流式仪测细胞周期,分别采用相同的四组高中低三种浓度(2.5%、5%、10%)含药血清培养BMSCs,分别培养48小时和72小时并采用MTT法测各组对大鼠BMSCs增殖的影响情况。成果：一、文献研究内外兼治,尤以补肾活血内服中药,治疗肱骨近端骨折,临床疗效更佳。影响骨折愈合的因互较多,现以骨折生长因子的在其过程中作用受到重视。血瘀,肾虚为其中医病机,补肾活血法从细胞分子水平其治疗骨折的作用应得到肯定。二、补肾活血方与钙尔奇D治疗肱骨近端骨折的临床疗效补肾活血方治疗肱骨近端骨折骨代谢生化指标影响结果,并与对照组比较。治疗组血清钙(Ca2+, mmol/L)治疗前为2.31±0.19,治疗后为2.30±0.14；对照组治疗前为2.29±0.18,治疗后2.33±0.15。治疗组血清碱性磷酸酶(ALP,U/L)治疗前为93.67±15.2,治疗后为99.47±14.93；对照组治疗前为92.13±14.45,治疗后95.47±11.96,补肾活血治疗组与标准对照组经治疗后血清ALP比较具有统计学差异(P<0.05),但与对照组比较无明显统计学差异(P>0.05)。治疗组血清骨钙素(OCN,ng/mL)治疗前为29.20±13.42,治疗后为34.34±13.00；对照组治疗前为28.74±12.50,治疗后34.01±12.85。两组治疗前后比较差别具有统计学意义(P<0.05),与对照组比较却不存在显著统计学差异(P>0.05)。补肾活血方组30例,显效与有效28例,无效2例,有效率93%,而显效人数21例,显效率达70%；钙尔奇D组共29例,有效人数24例,无效5例,有效率83%,显效人数11例,显效率37%。比较补肾活血组与钙尔奇D组显效率,存在统计学差异(P<0.05)。三、实验研究1.大鼠BMSCs的分离、培养、扩增及鉴定结果表明,胞浆为红色,核为蓝色,可测定CD44阳性,CD105阴性,细胞表面抗原标志CD34表达率极低,几乎检测不到,这与BMSCs表型特征相符。2.补肾活血方及其拆方含药血清及不同浓度对BMSCs细胞增殖的影响细胞周期测定：采用流式细胞仪检测细胞周期,其结果示补肾活血组较补肾组、活血组及对照组含药血清培养的BMSCs具有的细胞增殖能力存在明显差异,具有统计学意义(P<0.05)。MTT法测定：补肾活血全方组、活血组、补肾组及空白对照组分别干预48小时和72小时后,前三组的每组均与相同浓度的对照组比较,干预48小时浓度为高中浓度(10%、5%)的补肾活血组的含药血清较高中浓度(10%、5%)的对照组具有更明显地促进BMSCs细胞增殖的能力(P<0.05)。干预48小时,补肾活血组高中浓度含药血清均与同组的低浓度含药血清之间促进BMSCs细胞增殖能力有统计学差异(P<0.05),而高浓度与中浓度组间促进BMSCs细胞增殖能力接近,统计学分析不存在显著差异(P>0.05),为进一步实验筛选出了最佳中药组合及最佳浓度。结论：1.肱骨近端骨折内外兼治疗效显著,以补肾活血立法治疗骨折符合临床实际。2.补肾活血方对骨折患者骨代谢指标具一定促进作用,影响成骨细胞增殖作用,改善临床症状,疗效明确,临床可应用。3.补肾活血立法的中药高浓度含药血清具有促进BMSCs细胞增殖的能力,较单独使用活血法或补肾法效果更佳。