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高分辨率熔解曲线(High resolution melting, HRM)分析技术作为一种新的分子诊断方法在人医医学领域应用较广泛,而在兽医分子诊断领域,尤其在动物病毒基因分型与检测方面国内外研究较少。因此,本研究目的是比较HRM不同分析方法在动物病毒基因分型中的特点,建立常见重要动物疫病快速诊断PCR-HRM方法,为该项技术在兽医临床上的应用提供参考依据。本研究选取三种DNA病毒如,犬细小病毒(Canine Parvovirus, CPV)、番鸭(Muscovy Duck Parvovirus, MDPV)和鹅细小病毒(Goose Parvovirus, GPV);两种RNA病毒,猪瘟病毒(Classical Swine Fever Virus, CSFV)和猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus, PRRSV)和一种逆转录病毒,禽白血病病毒(Avian Leukosis Virus, ALV)作为研究对象,并针对各类型病毒特点采取不同的HRM分析方法。为了区分CPV-2不同基因型,在CPVVP2基因426氨基酸位点和第87氨基酸位点分别设计引物CPV-426F/R和引物CPV-87F/R,建立了区分CPV-2不同基因型的PCR-HRM分析方法,并从30份临床样品中成功检测出19份CPV-2a(GCP>98%)、8份CPV-2b(GCP>90%)、2份CPV-2c (GCP>98%)样品和1份混合感染样品(CPV-2a/2b);根据MDPV和GPVVP3基因序列差异设计出一对简并引物MGV-P1/P2,建立了区分MDPV和GPV的PCR-HRM分析方法。从12份临床样品中检测出2份MDPV阳性样品(GCP>95%)、2份GPV阳性样品(GCP>95%)、1份VP3基因重组样品和7份MDPV/GPV混合感染样品；根据猪瘟野毒株与疫苗毒株3’UTR区12个碱基的差异,设计出一对特异性引物CSFV-F3/F4进行PCR-HRM分析。临床样品检测结果表明12份临床样品均为CSFV野毒株,未检测到疫苗毒株,并建立了以CSFV野毒株临床样品GCP-3SD值(45-100%)作为区分CSFV野毒株和疫苗毒株判别标准的PCR-HRM分析方法；利用PRRSVNsp3序列差异建立了区分H-PRRSV和C-PRRSV的UP-HRM方法。从21份临床样品中共检测出4份C-PRRSV阳性样品(探针峰Tm为65.1±0.28℃),17份H-PRRSV阳性样品(探针峰Tm为75.3±0.37℃)。并根据JXA1-R疫苗毒株特异SNP位点,从17份H-PRRSV阳性样品中鉴定出3份疑似JXA1-R疫苗毒株样品；根据禽白血病病毒GP85基因序列筛选出一对ALV-J亚型特异引物H5/H7b和一对ALV-A/B/C/D//E/K亚型通用引物Gp85U3/Gp85L3,利用片段扩增方法建立了区分禽白血病病毒不同亚型PCR-HRM方法,并从476临床样品中鉴定出82份ALV-K亚型和15份ALV-J亚型样品。由于ALV-E亚型(ev位点)病毒在长期进化过程中已整合进鸡的基因组,ALV-E亚型(ev位点)具有独有的熔解曲线特点,容易从其它外源型ALV病毒中区分出来。因此,该方法可用于禽白血病净化工作中。本研究建立了六种常见动物病毒PCR-HRM检测方法,并系统比较了PCR-HRM不同分析方法在动物病毒基因分型中的异同,为动物传染病分子诊断提供一种快速、简单、成本低廉的PCR-HRM检测方法。