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前列腺癌在欧美国家是影响男性健康的第二大癌症,导致死亡人数仅次于肺癌,其发病率高于亚洲国家。据 SEEP(Surveillance,Epidemiology and End Results Program)统计,2015年美国大约有220,800新增前列腺癌患者,其中86,380人死于前列腺癌。随着经济发展及人们生活水平的提高,在我国罹患前列腺癌的人数逐年增加,已严重威胁我国中老年男性的健康。PI3K/AKT激酶是丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,主要调节促生存信号网络并影响细胞增殖、存活和基因表达等细胞生理过程,使AKT成为一个潜在的治疗或预防癌症的分子靶标。AKT的持续激活已与各种癌症的发生、发展和转移密切相关。活化的AKT通过促进转录因子CREB及NF-kB的表达和抑制促凋亡转录因子FOXOs来扰乱细胞的存活与凋亡的平衡。目前,国内外对中药免疫调节作用的研究多为单味药及其所含的单体成分,CFF-1作为一种复方中药,其研究较少且不深入。本研究通过形态学观察、细胞活性检测、细胞核破裂凋亡检测、Western blot实验以及细胞自噬和凋亡相关的分子水平检测,探讨了复方中药CFF-1处理前列腺肿瘤细胞后导致的细胞形态变化、细胞凋亡所致的核破裂以及细胞自噬和凋亡的分子机制。实验结果显示:(1)不同浓度(0 mg/mL、2 mg/mL、5 mg/mL和10 mg/mL)的CFF-1处理前列腺癌细胞和正常细胞后,发现CFF-1能选择性地抑制前列腺癌细胞的增殖和黏附,并且细胞的存活率呈现降低趋势;(2)随着复方中药CFF-1的处理浓度增加,前列腺癌细胞核凝缩破裂随之增加;CFF-1显著提高前列腺癌细胞的凋亡率;并且CFF-1 导致前列腺癌细胞周期阻滞在G1期;(3)在分子机制上,CFF-1与EGF竞争性地抑制EGFR的自磷酸化,并抑制EGF/EGFR通路活性,进而抑制了 EGFR下游PI3K/AKT和RAF-1/MEK/ERK信号通路的活性,并进一步降低FOXO1磷酸化水平,促进FOXO1的转录活性;(4)PI3K/AKT和RAF-1/MEK/ERK信号通路以及FOXO1活性的抑制,进一步抑制了 mTOR/p70S6K信号通路的活性,并分别上调了 Bim、Fas-L、c-Caspase8、c-Caspase9、c-Caspase3、Bax、c-PARP-1、p21 和 p27 的蛋白水平,下调了抗凋亡相关蛋白Bcl-2、XIAP、Survivin和周期蛋白Cyclin D1的蛋白水平;最终导致前列腺肿瘤细胞周期阻滞在G1期并发生细胞自噬现象,促使前列腺癌细胞走向凋亡;(5)体内实验进一步揭示了 CFF-1通过增加c-Caspase 3、c-PARP-1和LC3II的蛋白水平,减少p-AKT、p-ERK、p-FOXO1和Cyclin D1的蛋白水平进而抑制裸鼠皮下异种移植瘤的生长。综上所述,CFF-1对前列腺癌细胞的选择性生长抑制并诱导癌细胞自噬和凋亡的实验结果,为复方中药CFF-1将来成为临床上治疗前列腺癌主要的候选药物提供理论和分子机制依据。