中国樱桃组培快繁及再生体系的建立

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中国樱桃(Prunus pseudocerasus L.)是起源于我国樱桃属的资源,具有自花结实、成熟期早、坐果率高、果实甜等特点,但其果实比甜樱桃的小,近些年来中国樱桃的品种资源逐步被改接成甜樱桃品种,造成我国这一特有的资源遭受流失和破坏的困境,因此对中国樱桃进行组培快繁及再生研究,为中国樱桃的种质资源保存、繁育,及进一步利用基因工程技术对中国樱桃进行遗传改良提供理论和技术依据。本实验通过研究不同类型的基本培养基、不同种类和浓度的生长调节物质、叶片的放置方式、叶片的不同部位、琼脂的浓度、及光照条件等因子对中国樱桃组织快繁及植株再生的影响,探讨了中国樱桃品种‘泰小红樱’的茎段分化、新梢增殖、生根培养的适宜培养基,及组培苗叶片再生体系,主要试验结果如下:1.以泰小红樱的半木质化新梢的单芽茎段为外植体,经常规灭菌后在无糖MS固态培养基中培养7天后再转入到常规含糖培养基上,能很好地降低茎段培养的污染率。2.以泰小红樱的半木质化新梢的单芽茎段为外植体,侧芽分化的最佳培养基为:MS + 6-BA 1.0mg/L + NAA 0.1 mg/L,在该培养基条件下,新梢生长较快且健壮。3.‘泰小红樱’最佳增殖培养基为:WPM + 6-BA 1.0 mg/L + NAA 0.1 mg/L,在该培养基条件下,‘泰小红樱’表现为丛芽增殖和腋芽增殖两种增殖方式并存,增值系数达8.0。4.‘泰小红樱’最佳生根培养基为:1/2 MS + IBA 0.5mg/L,在该培养基条件下,生根率达90%,且根系数量多、根系长、生长健壮、质量好。5.‘泰小红樱’组培苗的叶片诱导愈伤组织的较好培养基及激素组合为:WPM + 6-BA 2.0 mg/L + NAA 0.2 mg/L,在该培养基条件下,选择刚展开的新叶(即新梢顶端3-5片叶),取叶基部(含叶柄)为外植体,叶片的正面直接接触培养基,琼脂粉浓度为5g/L,暗培养7天再转入光培养,诱导效果最好,叶片愈伤化诱导率达100%。愈伤组织呈结构致密的颗粒状,且有疑似不定芽的生长点形成。
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