吗啡成瘾对小鼠腹腔巨噬细胞表达CD80和MHC-Ⅱ分子的影响

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实验和临床研究都证实阿片类药物对免疫系统的各个部分有着不同的影响。巨噬细胞是一类重要的免疫细胞,可以提呈抗原活化T细胞, 主要组织相容性复合体Ⅱ类分子(MHC-Ⅱ)的表达是完成抗原提呈的必须条件,CD80是协同MHC-Ⅱ活化T淋巴细胞最重要的协同刺激分子。本研究旨在了解吗啡成瘾和戒断过程中巨噬细胞的抗原提呈能力的改变。在本实验中,我们测定了小鼠在成瘾过程中吗啡对腹腔巨噬细胞表达协同刺激分子CD80和MHC-Ⅱ分子的影响。〔材料和方法〕BALB/c小鼠45只随机分3组,每组15只:吗啡组(3个亚组,n=5)参照EL-Kadi法采用后肢皮下注射剂量递增法形成吗啡依赖模型;戒断组(3个亚组,n=5)在注射吗啡前30分钟皮下预先注射1/10吗啡量的纳络酮;对照组(3个亚组,n=5)给予相同体积的生理盐水。三组中1~3亚组分别于第3,5,7天脱颈杀死动物,用冷的PBS液反复冲洗腹腔,抽出腹腔液后洗涤、离心,计数,用含10%小牛血清的1640液调整细胞浓度1×106/ml。分别加入PE标记的抗小鼠CD80单克隆抗体和FITC标记的抗小鼠MHC-Ⅱ单克隆抗体 ,流式细胞仪检测腹腔巨噬细胞表面CD80和MHC-Ⅱ的表达。了解长期应用吗啡对小鼠腹腔巨噬细胞抗原提呈能力的影响的可能机理。<WP=6>〔结果〕1. 小鼠后肢皮下剂量递增法注射吗啡7天后,成功建立吗啡成瘾模型。纳洛酮催瘾后的戒断症状和阳性反应的统计学指标明显高于对照组(P<0.05) 。2. 皮下注射吗啡后,第5天可观察到吗啡组小鼠腹腔巨噬细胞表达CD80的量显著增加了45%,这种变化具有统计学意义(P<0.05);同时观察到戒断组小鼠腹腔巨噬细胞表达CD80也有显著提高但较吗啡组低,为33%,这种差异有统计学意义(P<0.05)。第7天时,两组小鼠腹腔巨噬细胞表达CD80仍然处于高表达水平分别增加53%和44%。3. 在第5天时,观察到吗啡组和戒断组小鼠腹腔巨噬细胞MHC-Ⅱ的表达明显下降,与对照组相比分别下降了40.4%和28%,具有统计学意义(P<0.05);但戒断组下降的幅度较吗啡组的小,具有统计学上的意义(P<0.05);第7天时,两组小鼠腹腔巨噬细胞表达MHC-Ⅱ保持在较低的水平,分别降低了45.7%和34.6%。〔结论〕此项实验的结果表明,①小鼠在成瘾过程中,吗啡引起了腹腔巨噬细胞表达CD80显著升高和MHC-Ⅱ显著下降,这可能是导致腹腔巨噬细胞抗原提呈功能下降的原因之一。②纳络酮可以对抗吗啡对腹腔巨噬细胞抗原提呈功能的影响说明此种影响至少一部分是通过阿片类受体起作用的。在巨噬细胞抗原提呈的过程中,MHC-Ⅱ和CD80的表达是很重要的。
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