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目的:研究蒙古沙鼠脑缺血再灌注损伤后脑组织中Hsp27和STAT3表达的变化、神经保护作用及二者之间有无相关性。
方法:(1)动物分组:健康雄性蒙古沙鼠45只,随机分为三组:正常对照组(normal group),假手术组(sham-operated group)和脑缺血再灌注组(I/R group)。其中假手术组和脑缺血再灌注组又分为四个亚组:六小时组(6h),一天组(1d),三天组(3d)和七天组(7d);(2)模型制作:除了正常对照组之外其他动物都用3%戊巴比妥麻醉后做颈总动脉切口,分离双侧颈总动脉。脑缺血再灌注组予以夹闭双侧颈总动脉十分钟后再灌注恢复血流。假手术组仅分离双侧颈总动脉不予夹闭。在对应的时间点断头处死各组动物;(3)HE染色观察脑组织的病理变化;(4)免疫组织化学染色观察Hsp27和STAT3的表达情况;(5)所有统计分析均用SPSS13.0统计软件包完成。
结果:
1.HE染色:正常对照组和各假手术组的脑组织形态结构没有明显的变化;脑缺血再灌注组根据时间点的不同可见胶质细胞增生、肥大,细胞间质和细胞水肿,神经元坏死;
2.免疫组化染色Hsp27的表达:正常对照组和各假手术组的脑组织中均有Hsp27的表达,但表达很低。缺血再灌注损伤六小时后Hsp27的表达上调,于第一天达到高峰,三天、七天开始下降但仍高于正常组和假手术组(与正常组和各假手术组组间比较P<0.05,组内不同时间点比较P<0.05);
3.免疫组化染色STAT3的表达:正常对照组和各假手术组的脑组织偶可见STAT3的表达,在脑缺血再灌注后表达明显增高,于第一天达到高峰,三天、七天开始下降但仍明显高于正常组和假手术组(与正常组和各假手术组组间比较P<0.05,组内不同时间点比较P<0.05; (4)Hsp27和STAT3在缺血再灌注脑组织中的表达趋势相同呈正相关的关系(P<0.05)。
结论:
1.缺血再灌注的脑组织中Hsp27和STAT3表达均升高;
2.STAT3在缺血再灌注脑组织中上调Hsp27表达并协同Hsp27发挥神经保护作用。