Fe代谢与老年轻度认知功能障碍患者中医证型相关性及Fe3O4纳米酶促神经分化机制研究

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第一部分Fe代谢与老年人轻度认知功能障碍及其中医证型相关性研究目的:探讨Fe代谢与老年人轻度认知功能障碍(mildcognitiveimpairment,MCI)及其中医证型的相关性。方法:根据纳入标准、排除标准,最后入组150例,其中轻度认知功能障碍MCI组108例,正常对照(Normal Control,NC)组42例,比较两组之间年龄、性别、受教育年限等因素之间是否有差异;测定受试者生化指标和Fe代谢相关指标,分析各因素与认知功能相关性;对认知功能障碍患者进行辨证分型,分析不同中医证型与Fe代谢指标的相关性。结果:1.两组之间年龄、受教育年限、低密度脂蛋白差异明显,MCI组较NC组年龄更大,受教育年限更短,低密度脂蛋白水平更高,有统计学意义(p<0.05);饮酒史、吸烟史、是否独居、糖尿病史、高血压病病史、BMI、BADL评分无明显差异(p>0.05)。2.轻度认知功能障碍MCI组血红蛋白、血清铁、可溶性转铁蛋白受体较NC组低,血清铁调素水平较NC组高,差异有统计学意义(p<0.05)。血清铁蛋白、转铁蛋白、总铁结合力在两组之间无明显差异(p>0.05)。3.多元线性回归分析显示,受教育年限与MoCA评分呈正相关,铁调素水平与MoCA评分呈负相关。4.老年MCI患者常见证型为气血不足和脾肾亏虚证,两种证型认知功能损害最严重,证候积分最高,血红蛋白和血清铁水平均低于瘀阻脑络、阴虚阳亢和腑滞浊留证,铁调素水平高于瘀阻脑络、阴虚阳亢和腑滞浊留证。结论:1.年龄、受教育年限、高低密度脂蛋白水平、低血红蛋白、低血清铁水平、低可溶性转铁蛋白受体、高铁调素水平是老年人轻度认知功能障碍的危险因素。2.受教育年限和铁调素与认知功能障碍关系最密切,受教育年限与MoCA评分呈正相关,铁调素水平与MoCA评分呈负相关,可作为评估认知功能障碍严重程度的潜在标记物。3.气血不足和脾肾亏虚证是老年MCI的优势证型,认知功能损害最为严重,在这两种证型中,血清铁、血红蛋白显著降低,铁调素水平显著升高。第二部分Fe3O4纳米酶促进D-半乳糖致衰老小鼠神经母细胞分化机制研究目的:探讨Fe3O4纳米酶促进D-半乳糖致衰老小鼠神经母细胞分化的作用机制。方法:70只雄性ICR小鼠随机分为5组,对照组(Control组)、100mg/kg D-gal处理组(D-gal 组)、10μg/ml PEG-Fe3O4 纳米酶处理组(pFe3O4 组)、10μg/ml PEG-Fe3O4 纳米酶+100 mg/kg D-gal 处理组(pFe3O4+D-gal 组)、50 mg/kg Melatonin(褪黑素)+100 mg/kg D-gal组(Mel-gal组),除对照组和pFe3O4组,其余各组小鼠每天腹腔注射D-半乳糖100 mg/kg,共12周。第九周起,Mel-gal组每日予Melatonin灌胃一次,每次50 mg/kg体重,给药4周。pFe3O4+D-gal组和pFe3O4组予Fe3O4纳米酶(10μg/ml,生理盐水稀释)每日饮用,给药4周。电感耦合光谱仪测定脑中Fe元素含量;免疫组化测定海马齿状回神经母细胞分化、神经胶质细胞活化、血管内皮细胞变化;蛋白印迹分析抗氧化酶相关蛋白、紧密连接蛋白、凋亡和自噬相关蛋白表达情况。结果:1.Fe3O4纳米酶显著增加衰老小鼠海马齿状回的DCX(doublecortin)阳性神经母细胞数量。2.Fe3O4纳米酶显著提高衰老小鼠海马区抗氧化酶标记蛋白SOD-1、2和Catalase的蛋白表达。3.Fe3O4纳米酶显著抑制衰老小鼠海马区星形胶质细胞和小胶质细胞活化。4.Fe3O4纳米酶维持衰老小鼠海马区血脑屏障完整性,同时激活自噬、减少凋亡相关蛋白表达。结论:Fe3O4纳米酶能发挥其类抗氧化酶活性,通过抗胶质化、维持血脑屏障完整性、激活自噬和抗凋亡促进衰老小鼠海马齿状回神经母细胞分化。
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