前列腺癌(Prostate cancer,PCa)是威胁男性健康常见的恶性肿瘤之一。目前我国男性的前列腺癌发病率低于西方发达国家,但随着我国生活、饮食等环境习惯的改变和人口老龄化趋势的增加,近些年来,前列腺癌的发病率及死亡率在我国呈现逐年增长的趋势。在该病的发展早期,主要采用根治性前列腺切除术、放疗、化疗、内分泌治疗等方法可以在一定程度上控制或治疗该肿瘤疾病,但对于前列腺癌晚期患者来说,目前还没有疗效显著的治疗方法。特别是激素疗法的使用,很容易使得该肿瘤疾病由激素依赖性前列腺癌(ADPC)转变为去势抵抗型前列腺癌(CRPC),而后者治疗难度很大且死亡率极高。MicroRNAs(mi RNAs)是一类由内源基因编码、长度为19-25bp的非编码单链RNA分子,主要通过影响靶基因mRNA的稳定性和翻译效率来调控基因的表达,在细胞中具有多种重要的调节作用。相关文献证明,miRNAs通过与靶基因mRNA的3’端非编码区(3’-UTR)完全或不完全互补配对,实现对靶基因的调控作用。mi RNAs近年来一直被认为具有抑制肿瘤细胞增殖、迁移和侵袭等的潜在功能。已有文献报道,由于miRNAs与前列腺癌的诊断治疗、侵袭迁移、EMT转移、ADPC到CRPC的转化以及miRNAs与雄激素信号之间存在密切联系,所以miRNAs在前列腺癌的发生、发展及诊断治疗中发挥重要作用。miR-382是位于14q32位点区域的一个miRNA,长度为22bp(has-mi R-382,5’-GAAGUUGUUCGUGGUGGAUUCG-3’)。大量的实验证明了,miR-382在结肠癌、血管瘤初期、卵巢癌、乳腺癌、非小细胞肺癌、食道鳞状细胞癌和骨肉瘤癌等均具有一定的调控作用。其主要是通过对靶基因的调控,从而抑制肿瘤细胞的生长、增殖和代谢,因而miR-382在这些肿瘤疾病中具有作为抑制剂使用的潜能。那么,miR-382在前列腺癌中的作用是什么?miR-382是否具有抑制前列腺癌细胞的生长、增殖与代谢作用?作用机制又是什么?针对上述问题,我们进行了以下三方面的研究:1)首先,从西安唐都医院收集了30对前列腺癌患者癌组织及癌旁组织,又从美国菌种保藏中心购买了4株前列腺癌细胞系(LNCaP、PC-3、22RV-1和DU-145)和1株正常人类前列腺上皮细胞系(RWPE-1)。通过RT-qPCR方法分别对组织和细胞中的miR-382表达量进行测定分析;2)miR-382 mimics和anti-miR-382基因分子分别转染LNCaP和PC3细胞,通过构建miR-382高水平表达和低水平表达的模型,来测定miR-382对前列腺癌细胞生物学行为的影响;3)用miRwalk软件预测miR-382的靶基因,通过双荧光素酶报告基因检测进行验证。miR-382 mimics和COUP-TFⅡ基因共转染细胞后,通过RT-qPCR、Westren-blot、细胞增殖和代谢实验等方法,来研究miR-382抑制前列腺癌细胞增殖和代谢的分子作用机制。通过以上实验研究,得到了如下的结果:1)miR-382在前列腺癌组织和细胞中低水平表达,可见miR-382在前列腺癌的发生发展过程中起着重要作用;2)与对照组相比,mi R-382高水平表达能够抑制前列腺癌细胞LNCaP和PC3的生长、增殖、迁移与侵袭,而miR-382低水平表达表现出了促进LNCaP和PC3细胞的生长、增殖、迁移与侵袭的作用,由此可知miR-382具有作为肿瘤抑制剂使用的潜能;3)miR-382发挥调节作用的靶基因是COUP-TFⅡ且结合位点位于mRNA的3’端非编码区(3’-UTR)。miR-382通过调控COUP-TFⅡ蛋白的低水平表达从而抑制了前列腺癌细胞的增殖与代谢,反之前列腺癌细胞中COUP-TFⅡ表达恢复后能够反过来抑制miR-382的调节作用。我们的研究首次证实了miR-382在前列腺癌的发生发展过程中起着重要作用;miR-382高水平表达能够抑制前列腺癌细胞LNCaP和PC3的生长、增殖、迁移与侵袭;miR-382通过调控靶基因COUP-TFⅡ的低水平表达从而对前列腺癌的发展起到一定的抑制作用。本课题对前列腺癌相关机制进行研究,从而为前列腺癌的诊断、治疗等提供新思路与新靶点。