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胃癌是我国高发的恶性肿瘤之一,目前对胃癌的治疗研究取得了一定的进展,但对失去手术机会的中晚期胃癌和术后复发的患者,尚缺乏有效的治疗方案。近年来从中药及其方剂中寻找高效低毒的抗胃癌药物及其组方成为研究热点。本实验室前期研究中发现半枝莲提取物能够剂量依赖性地抑制肿瘤的生长,同时在一定程度上提高了机体的免疫力。因此本研究选取半枝莲的主要活性成分汉黄芩素进行研究,探讨汉黄芩素是否能够用于抗胃癌的治疗及其作用机理,为进展期胃癌寻求一种新的治疗药物。本文采用MTT法、流式细胞术等方法检测汉黄芩素对胃癌细胞株SGC-7901细胞的增殖、凋亡的影响,并初步探讨了其诱导细胞凋亡的机制；采用酶联免疫吸附实验、细胞免疫荧光方法检测汉黄芩素对SGC-7901细胞分泌血管内皮细胞生长因子(VEGF)的影响；流式细胞术检测汉黄芩素对SGC-7901细胞表面MHCI类相关抗原A(MICA)表达、及对外周血单核细胞诱导来源的树突状细胞(DC)活性的影响。实验结果如下：1.汉黄芩素抑制SGC-7901细胞增殖：汉黄芩素不同浓度(5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml、40μg/ml、80μg/ml、160μg/ml)均能抑制SGC-7901细胞的增殖,与溶媒组比较,具有显著性差异(P<0.05),且呈剂量和时间依赖性(P<0.05)2.汉黄芩素诱导SGC-7901细胞的凋亡：随着药物浓度的增加,细胞凋亡率逐渐增加。40μg/ml、160μg/ml浓度的汉黄芩素作用SGC-7901细胞24h后凋亡率与溶媒组比较均有显著性差异(P<0.05)3.汉黄芩素促进SGC-7901细胞内活性氧(ROS)的释放：10μg/ml、40μg/ml、160μg/ml浓度的汉黄芩素作用细胞24h后胞内ROS均明显增加,与溶媒组比较,均有显著性差异(P<0.05),且呈剂量依赖性(P<0.05)。4.汉黄芩素增加SGC-7901细胞内半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的浓度：10μg/ml、40μg/ml、160μg/ml浓度的汉黄芩素作用细胞24h后胞内Caspase-3均明显增加,与溶媒组比较均有显著性差异(P<0.05),且呈剂量依赖性(P<0.05)5.汉黄芩素抑制SGC-7901细胞分泌VEGF:汉黄芩素呈剂量依赖性地增加SGC-7901细胞内VEGF的水平,但汉黄芩素作用后的SGC-7901细胞上清中VEGF水平呈剂量依赖性地降低(P<0.05)。6.汉黄芩素下调SGC-7901细胞表面MICA抗原的表达：10μg/ml、40μg/ml、160μg/ml的汉黄芩素均能抑制SGC-7901细胞表面MICA抗原的表达。汉黄芩素各组与溶媒组比较均有显著性差异(P<0.05),且呈剂量依赖性(P<0.05)。7.汉黄芩素抑制树突状细胞(DC)的成熟：汉黄芩素抑制健康个体和胃癌患者DC表面HLA-DR及CD86分子的表达,与溶媒组比较均有显著性差异(P<0.05)；有抑制脂多糖(LPS)诱导的DC成熟作用,能协同VEGF抑制DC的成熟。8.汉黄芩素处理后的SGC-7901细胞易被未成熟树突状细胞吞噬：随着汉黄芩素浓度的增加,未成熟树突状细胞吞噬作用越明显,呈剂量依赖性(P<0.05),汉黄芩素45μg/ml和135μ/ml与溶媒组比较有显著性差异(P<0.05)。结论：汉黄芩素有抑制SGC-7901细胞的增殖并诱导其凋亡的活性,其凋亡机制可能与细胞内ROS释放及Caspase-3活性增强有关。汉黄芩素能够抑制SGC-7901细胞分泌VEGF及表面MICA抗原的表达。汉黄芩素有抑制人外周血单核细胞诱导来源的DC成熟的作用,且汉黄芩素处理后的SGC-7901细胞形成的凋亡小体易被未成熟DC吞噬。