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猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)是猪地方流行性肺炎(Porcine enzootic pneumonia,PEP)的病原菌,是最具经济意义的呼吸道病原体之一。了解其致病性的分子机制对于开发有效的干预措施来防控这种猪呼吸道疾病至关重要。未折叠蛋白反应(Unfolded protein response,UPR)是宿主抵抗病原微生物侵袭的第一道防线,调控宿主UPR过程在侵袭性病原体的发病机制中起着重要作用,因此我们从Mhp与UPR的相互关系的角度展开了本项研究。在研究中我们发现Mhp可以抑制宿主细胞(猪原代气管上皮细胞PTEC和猪肺泡巨噬细胞PAM)UPR的标志分子GRP78和CHOP的表达,甚至能阻断UPR激活剂衣霉素(Tunicamycin)对PTE细胞UPR的诱导作用,表明Mhp能够抑制宿主UPR,而这种现象之前只在Simkania negevensis(衣原体相关的一种细菌)中出现过。进一步检测发现Mhp感染减少PERK/eIF2α磷酸化、ATF6裂解以及XBP1剪接,证明Mhp显著抑制了UPR三条通路(PERK、ATF6和IRE1α信号通路)的表达水平。值得注意的是,我们分别利用特异性化学抑制剂模拟了Mhp对UPR信号通路的抑制作用之后,利用TaqMan qPCR和流式细胞术检测Mhp对PTE细胞的黏附和感染水平,发现UPR及其任一条信号通路抑制均能促进Mhp对PTE细胞的黏附和感染。与之相反,激活剂或过表达方式分别激活UPR的三条信号通路均会减少Mhp对PTE细胞的黏附。作为支原体属微生物的Mhp,对宿主细胞黏附是其定植宿主的第一步,也是其感染宿主和随后增殖的关键步骤。为了进一步确定其黏附和感染能力增加的分子机制,我们开展了其下游相关的信号通路的研究。研究结果显示UPR被抑制进而减少了P65蛋白的磷酸化水平从而干扰了NF-κB信号传导。进一步研究发现猪β防御素2(Porcine beta-defensin 2,PBD-2)的产生是依赖于NF-κB信号通路,PBD-2被认为是一种重要的上皮细胞分泌的抵抗细菌感染的抗菌肽,尤其是抵抗呼吸道致病菌中具有重要的作用。因此NF-κB信号通路被干扰引起了PBD-2的释放量的减少,最终导致Mhp的黏附能力的增加。研究结果还显示PBD-2的减少能够促进Mhp的黏附素蛋白P97和P116的表达。综上所述,Mhp通过抑制UPR反应干扰NF-κB的信号传导,进而减少PBD-2的释放,从而促进其对PTE细胞的黏附和感染。我们的研究结果阐述了UPR在调节PBD-2释放和Mhp感染中的重要作用,为Mhp的分子发病机制提供了新的见解,以及拓宽了我们对Mhp感染与宿主抗细菌免疫应答之间相互作用的认识。