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疟原虫抗药性的产生和扩散已使全球疟疾疫情严重恶化,每年疟疾死亡人数自上世纪七十年代的约50万上升至目前约100万,药物防治疟疾的措施亦面临严重的困难和挑战。因此新的疟疾控制措施的实施已成为当务之急。疫苗接种已使许多种传染病得到有效的控制乃至根除,因此研制有效的疟疾疫苗成为防止疟原虫感染的重要手段。Pf332是恶性疟原虫基因组所编码的分子量最大的蛋白质。该蛋白质具有典型的跨膜蛋白结构,其膜外区含有一个保守的Duffy抗原结合基团相类似的功能区(Duffy-binding like, DBL domain)。Pf332由红内期恶性疟原虫分泌运输到感染的红细胞表面,在裂殖子侵入红细胞的过程中起到了辅助作用。由于其膜外DBL区与其他膜外区蛋白质相比具有高度的保守性,使其可能成为发展新的抗疟药物和疫苗的候选分子。本研究制备得到12株抗Pf332-DBL区重组蛋白质的IgG1亚型单克隆抗体,通过Western blot和间接免疫荧光实验验证了这12株单抗不仅可以特异性识别重组蛋白质,而且可以识别虫体天然蛋白Pf332。在此基础上,根据Pf332-DBL区氨基酸序列合成9段多肽,以肽扫描的方法确定了单抗的结合肽段,通过单抗体外抑制虫体侵入实验,发现Pf332-DBL区在疟原虫裂殖子侵入红细胞过程中发挥重要作用的两个功能区域位于第1~25个氨基酸和第76~100个氨基酸。在分析Pf332-DBL区重要生物学功能的同时,为确定其在疟疾疫苗研究中的可应用性,本研究还对Pf332-DBL区重组蛋白质的免疫原性进行了分析。通过比较Pf332-DBL区重组蛋白质与4种不同佐剂混合免疫动物后的抗体效价、抗体亚型及抗体维持水平,揭示出Pf332-DBL区具有很强的免疫原性,而且筛选到适合Pf332-DBL区在疫苗研究中的佐剂ISA720。本研究发现Pf332是疟原虫的一个重要功能蛋白质,DBL区是Pf332蛋白实施生物学功能的关键区域。Pf332-DBL区具有很强的免疫原性,是抗疟原虫的重要疫苗候选抗原。