环状hsa_circ_0000977在结直肠癌中的表达及临床意义

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目的癌症已经成为了中国人第一大死亡原因,而结直肠癌作为一种常见的恶性肿瘤,在我国结直肠带来的死亡情况也同样严峻,死亡率为每10万人有12名,结直肠癌被发现时已经是中期甚至是晚期,错过了最佳治疗时间,导致患者最终预后不佳。环状RNA作为一种广泛存在于人体组织、体液中的长链RNA,因为他的具有多样性和丰富性,环状结构带来的稳定性,成为了这些年的一个重要研究热点。它广泛的参与人体细胞的各种生命活动,参与了肿瘤的发生和发展,以上这些特性也展现出其可以作为一种新型的肿瘤标志物,甚至是新的肿瘤治疗靶点的潜力。方法1.本实验通过GEO数据库筛选了结直肠癌相关环状RNA并筛选差异表达倍数较高的环状RNA,最终选择显著低表达的hsa_circ_0000977作为目标环状RNA。2.收集结直肠癌患者术前和术后14天血清标本,癌组织和癌旁组织标本和健康志愿者血清标本。对福尔马林保存组织样本采用FEPE RNA Kit的方法提取样本总RNA,对结直肠癌手术中收集的新鲜组织标本使用Trizol法进行提取样本总RNA,而对于总RNA浓度较低提取难度较大的血清样本采用改良Trizol法进行提取。通过实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative reverse transcription polymerase chain reaction,q RT-PCR)检测hsa_circ_0000977在组织和血清中的表达量,并通过对癌组织和癌旁组织,术前血清和术后血清,患者血清和正常人血清的独立样本的t检验分析hsa_circ_0000977是否在上述标本之间是否存在统计学差异。3.通过SPSS 20.0软件分析得到的数据,通过卡方检验评价hsa_circ_0000977的表达水平和临床病理因素之间的联系,并通过Graph Pad Prism 7.0绘制出受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线,评估其特异度与敏感性,通过计算得到曲线下面积(Area Under Curve,AUC)分析hsa_circ_0000977成为新的结直肠癌的肿瘤标志物及治疗靶点的潜力。结果1.Hsa_circ_0000977在结直肠癌组织中表达水平明显低于癌旁正常组织。2.Hsa_circ_0000977在术前血清中的表达明显高于术后也明显高于健康人,而术后其血清中的表达量和正常人血清中的表达量无明显差异。3.根据hsa_circ_0000977的一系列q RT-PCR结果结合收集的临床相关性因素,我们发现的在组织中其的表达水平越低,临床病理情况越差。而在患者血清中期表达水平越高,临床病理情况越差。结论通过上述实验发现hsa_circ_0000977在结直肠癌与癌旁组织中,结直肠癌组织中表达水平明显下调,在患者血清组织中表达水平明显上调,术后其表达水平迅速下调。考虑其可能对结直肠癌的发生及发展过程中起到抑制作用,在组织和血清中的差异表达使其具有成为结直肠癌治疗新靶点成为新型肿瘤标志物的潜力。
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