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目的:通过建立兔外伤性增殖性玻璃体视网膜病变模型,观察散血明目片对其视网膜增殖膜中PI3K、AKT、MEK、P38MAPK蛋白的表达影响。方法:将42只新西兰大白兔随机分为A、B、C、D、E、F、G组,共7组每组6只。分别为:A组:空白组(正常组);B组:模型组;C组:散血明目片组;D组:PD98059组;E组:LY294002组;F:MK-2206组;G组:抑制剂混合组。造模后30min,向D组、E组、F组、G组分别向玻璃体腔注射0.1ml的PD98059、LY294002、MK-2206及三种混合抑制剂。B、C组则予以玻璃体腔内注射0.1ml生理盐水。术后第一天散血明目片组予以散血明目片10mg/kg溶液灌胃,除A组其余组以生理盐水10mL/kg灌胃,连续灌胃28天。造模后第1、3、7、14、21、28天分别用手持裂隙灯、直接眼底镜观察眼前节、眼底情况,眼底照相、眼部B超、三面镜记录眼底情况。28天后处死,取材将视网膜增殖膜送检,分别在光镜下观察视网膜各层的形态结构,免疫组化法检测各组视网膜增殖膜中PI3K、AKT、MEK、P38MAPK在视网膜各层的表达情况,qPCR法、Western Blot法检测各组视网膜增殖膜的PI3K、AKT、MEK、P38MAPK表达情况。结果:1.眼前节情况:术后各造模兔眼结膜不同程度出现充血,个别角膜出现水肿、前房有少量浮游物,个别兔眼出现晶状体混浊。术后第7天,各症状得以改善,眼前节炎症消除。2.眼底情况:成模后28天,造模组中玻璃体有不同程度混浊,明显可见增殖膜、增殖条索的形成,对局部视网膜有牵拉作用,并造成视网膜脱离。散血明目片组中玻璃体腔内可见少量的增生痕迹,未见明显的增殖条索,未有视网膜脱离。3.光镜下观察视网膜组织结构:模型组中视网膜水肿、各层结构紊乱,可见增生组织、大量的炎性细胞浸润以及胶原纤维的形成。散血明目片组中视网膜结构大致正常,可见少量炎性细胞,未见明显的增生。4.免疫组化法观察各指标在组织中的表达情况:模型组各层大都可见有棕黄色颗粒,以视网膜色素上皮层、视神经纤维层、节细胞以及增生组织中表达增多。散血明目片组表达较弱,以视网膜色素上皮层以及节细胞层表达居多。5.Western blot法检测指标蛋白在组织中的表达情况:用药28天后,可见各治疗组蛋白含量与模型组相比均有所降低。PI3K蛋白表达中:空白组与抑制剂混合组相比不具有统计学意义(P>0.05),与其他比较有差异(P<0.05或P<0.01)。PI3K蛋白在模型组中大量表达,散血明目片组以及四组抑制剂组与模型组比较,可见表达量明显弱于模型组,差异具有统计学意义(P<0.01)。药物干预组中,散血明目片组与抑制剂混合组相不具有统计学意义(P>0.05)。散血明目片与其他三组抑制剂相比表达量低,差异具有统计学意义(P<0.01)。AKT蛋白表达中:散血明目片组分别与抑制剂混合组、空白组比较表达相似,无统计学意义(P>0.05)。造模组中,各用药干预组蛋白表达量与模型组相比均低,有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。散血明目片组与抑制剂混合组比较无统计学意义(P>0.05)。散血明目片组与其余三组抑制剂组相比,表达量明显低于三组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。MEK蛋白表达中:各造模组中MEK蛋白含量均明显提高,模型组表达含量最高,与空白组比较差异均具有统计学意义(P<0.01)。造模各组中,与模型组比较均有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。在药物干预组中,散血明目片与抑制剂混合组、PD98059组比较表达量高,差异具有统计学意义(P<0.05),散血明目片组表达量明显低于LY294002组、MK2206组,较差异均有统计学意义(P<0.01)。P38MAPK蛋白表达中:各造模组与空白组比较,统计均有意义(P<0.01或P<0.05)。造模组中各组与模型组相比,表达量均比模型组低,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05),各用药干预组中,四组抑制剂组与散血明目片组相比表达量均高于散血明目片组,具有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。6.qPCR检测各指标在组织中的表达情况:PI3K mRNA表达情况:抑制剂混合组与空白组比较无统计学意义(P>0.05),其余六组与空白组比较有差异,具有统计学意义(P<0.01)。造模组中,药物干预组与模型组相比其表达量均有不同程度的降低,相比均有差异具有统计学意义(P<0.01)。各药物干预组中,散血明目片组与抑制剂混合组相比,表达相似,无统计学意义(P>0.05)。余组与散血明目片组比较差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。AKT mRNA表达情况:各造模组的AKT mRNA表达均有不同程度的提高,其中散血明目片组、抑制剂混合组与空白组比较无统计学意义(P>0.05)。造模组中,各药物干预组与模型组比较,表达量均比模型组低具有显著统计学意义(P<0.01或P<0.05)。各用药物干预组中,散血明目片组与抑制剂混合组比较无统计学意义(P>0.05)。散血明目片组与其它组相比表达量低,有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。MEK mRNA表达情况:造模组与空白组相比,均有差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01),各造模组中,模型组表达MEK mRNA显著,其余干预组与模型组相比,均具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。各用药干预组中,散血明目片组与抑制剂混合组、PD98059组比表达量高(P<0.05),与余干预组比较表达量低(P<0.01)。P38MAPK mRNA表达情况:各造模组均有不同程度的表达,模型组表达量最多。与空白组比较均有差异,具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。造模组中各组表达量均比模型组低,与模型组相比有差异,有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。各药物干预组中,散血明目片组与四组抑制剂相比表达量低,差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:1.散血明目片能改善兔PVR中视网膜的各层结构,减少炎性细胞浸润、减轻组织水肿、抑制增生组织的产生。2.散血明目片能够有效降低兔视网膜增殖膜中PI3K、AKT、MEK、P38MAPK的表达,但对其中MEK作用弱。3.散血明目片对PVR的防治可能与MAPK、PI3K/Akt信号通路有关。