BDNF在非过敏性鼻息肉中表达及嗜酸性粒细胞鼻息肉分类方法的研究

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研究背景和目的慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉(CRSwNP)是耳鼻咽喉科最常见的疾病之一,尽管部分CRSwNP患者伴过敏性鼻炎或哮喘以及其他过敏性因素,但也有一部分CRSwNP患者不伴过敏性因素的。脑源性神经营养因子(BDNF)在变应性鼻炎中的作用已经被报道,但尚未有研究报道BDNF在不伴过敏性因素的鼻息肉(non-allergic nasal polys,non-allergic NP)中的作用。这项研究的目的是为了研究BDNF在non-allergic NP中发病机制中的可能作用。研究方法选取2018年12月至2019年6月于住院治疗的non-allergic NP患者26例,行鼻中隔偏曲手术的下鼻甲黏膜22例作为对照组。所有患者均于术前行鼻窦冠状位+轴位平扫,并行Lund-Mackay CT评分,鼻内镜检查并评分、血清IgE过敏原的检测和肺功能检查。采用Elisa方法明确血清中的BDNF和嗜酸性阳离子蛋白(ECP)的表达水平。通过H&E及免疫荧光染色(IF)染色,对组织的上皮重塑及嗜酸性粒细胞的浸润进行评估和比较染色组织BDNF蛋白表达水平和KRT-5蛋白水平。通过实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)评估组织中BDNF,RNASE 3 和 CDK5 的 mRNA 水平。研究结果与对照组相比,non-allergic NP患者中血清BDNF水平以及组织中BDNF的mRNA和蛋白表达水平显著上调。在non-allergic NP患者中比对照组嗜酸性粒细胞浸润程度更高。与对照组相比,KRT5的蛋白水平在non-allergic NP患者显著上调。在non-allergic NP中,BDNF的浸润程度与肺功能中小气道阻塞的相关指标(MEF25-75%,MEF25%和MEF50%)之间呈显著负相关。将BDNF的浸润程度不同分为BDNFlow与BDNFhigh两个亚组,与BDNFlow亚组相比,BDNFhigh亚组的嗜酸性粒细胞浸润程度更高,RNASE3和BDNF的mRNA水平升高。此外,在BDNFhigh亚组中,发现MEF25-75%,MEF25%,MEF50%和MEF75%显著降低。研究结论BDNF可能在non-allergic NP发病机制中不仅具有局部组织的作用还有全身的作用,这可能与组织嗜酸性粒细胞浸润程度有关。BDNF可能成为嗜酸性NP治疗的新的治疗靶点或指标。研究背景和目的慢性鼻-鼻窦炎是(chronic rhinosinusitis,CRS)是鼻科最常见的疾病之一。慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉(CRSwNP)根据其嗜酸粒细胞浸润程度不同分为嗜酸粒细胞性慢性鼻窦炎伴鼻息肉(eosinophilic chronic rhinosinusitis with nasal polyps,Eos CRSwNP)和非嗜酸粒细胞性慢性鼻窦炎伴鼻息肉(non-eosinophilic chronic rhinosinusitis with nasal polyps,Non-Eos CRSwNP)两种亚型。然而,目前并没有统一的标准来界定嗜酸粒细胞性慢性鼻窦炎伴鼻息肉(Eos CRSwNP)和非嗜酸粒细胞性慢性鼻窦炎伴鼻息肉(Non-Eos CRSwNP)。这项研究的目的是比较两种主要的组织学分类方法,即嗜酸性粒细胞计数(Eos计数)和嗜酸性粒细胞百分比(Eos百分比)在区分嗜酸粒细胞性慢性鼻窦炎伴鼻息肉(Eos CRSwNP)和非嗜酸粒细胞性慢性鼻窦炎伴鼻息肉(Non-Eos CRSwNP)中的应用。研究方法选取267例CRSwNP的鼻息肉样本和行鼻中隔偏曲手术的下鼻甲黏膜31例作为对照组。用苏木素和伊红(H&E)对组织进行染色,随机选取五个高倍视野(HPF,X400),每个高倍视野(HPF)的嗜酸性粒细胞计数等于或高于5(≥5)(Def1)或嗜酸性粒细胞比例超过10%(即嗜酸性粒细胞占炎性细胞总数的比例)(Def2)来区分Eos CRSwNP和Non-Eos CRSwNP,然后分析两种分类方法(Def1和Def2)之间的相关性以及对于临床诊断的指导性。研究结果使用Def1类型定义的Eos CRSwNP的患者例数是113,使用Def2类型定义的Eos CRSwNP的患者例数是155。这两种分类方法具有一定相关性,且呈正相关(r=0.8691,p<0.0001)。但是,在炎性细胞总数很低的情况下,两种分类方法之间存在很明显的差异。通过绘制ROC曲线,我们获得了曲线下面积(AUC)为0.8381[95%置信区间(CI)0.7743-0.9018],灵敏度为78.3%,特异性为72.3%,Cut-off是133.5。说明仅当高倍视野下炎症细胞总数超过133.5个时,Def2的阳性预测值(PPV)91.25%和阴性预测值(NPV)87.35%才大大增加。在炎症细胞总数低于133.5个时,Def1比Def2对于Eos CRSwNP和Non-Eos CRSwNP的区分有更为准确的意义。研究结论我们的研究对于区分Eos CRSwNP还是Non-Eos CRSwNP的两种常见方法之间的进行了比较,得出了炎症细胞总数为133.5个的临界值,并且得出了炎症细胞总数在大于临界值的基础上,两种分类方法的结果基本一致。炎症细胞总数较低时,Def1是区分Eos CRSwNP和Non-Eos CRSwNP的首选方法。
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