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目的:针对当前市售的金黄色葡萄球菌检测试剂,应用Meta分析系统评价各检测方法的诊断价值,探讨影响各方法诊断价值的因素。进一步针对金黄色葡萄球菌现场检测的不足,利用免疫学检测技术的原理,以纳米材料为基础构建新型免疫比色分析方法,并评价方法的实用性和诊断价值。方法:计算机检索Pub Med、MEDLINE、Embase等英文数据库,获取公开发表的有关利用PCR、显色培养基和免疫学检测试剂诊断金黄色葡萄球菌感染的英文文献,检索时限为2010年1月1日至2021年9月31日。根据预先制定的纳入与排除标准筛选文献,使用STATA软件对所获得数据进行分析,计算灵敏度、特异度、诊断比值比（DOR）和曲线下面积等,并进行发表偏倚分析、异质性检验、敏感性分析评价结果的可靠性与稳健性。以检测对象、样本来源、检测的靶基因、孵育时间、发表年份、样本量等为协变量进行Meta回归和亚组分析。制备双标记纳米探针（Ig Y-Au NP-ALP）、非特异性磁珠及金纳米棒三种纳米材料,并对其形貌、尺寸等进行表征。以非特异性磁珠为分离器捕获金黄色葡萄球菌,利用Ig Y-Au NP-ALP与目标菌特异性结合并形成磁免疫夹心复合物。基于碱性磷酸酶催化的显色反应构建金黄色葡萄球菌的快速检测方法,优化实验条件,评价所建立方法的检测限、特异性及实际应用中的可行性。结果:1.本研究汇总纳入的金黄色葡萄球菌检测方法的文献中,PCR的合并灵敏度为92.6%,特异度为98.1%,DOR为644.16。PCR在不同的检测对象、样本来源、检测的靶基因、发表年份和样本量之间的灵敏度和特异度的差异均具有统计学意义（P＜0.001）,不同循环阈值间仅特异度的差异具有统计学意义（P＜0.001）。显色培养基的合并灵敏度为94.8%,特异度为98.7%,DOR为1523.28。显色培养基在不同的样本来源、不同的孵育时间及不同样本量之间的灵敏度和特异度的差异均具有统计学意义（P＜0.001）。免疫学检测技术的合并灵敏度为96.9%,特异度为99.9%。2.以鼻拭子为样本来源或以耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）为检测对象,比较PCR和显色培养基的诊断价值。检测鼻拭子时,PCR的灵敏度、特异度、DOR分别为92.1%、97.2%、414.47,显色培养基的灵敏度和特异度、DOR分别为91.4%、97.5%、439.75,灵敏度和特异度的差异均具有统计学意义（P＜0.001）。检测MRSA时,PCR的灵敏度、特异度、DOR分别为91.0%、98.1%、539.99,显色培养基的灵敏度、特异度、DOR分别为94.9%、98.8%、1660.75,灵敏度和特异度的差异均具有统计学意义（P＜0.001）。3.本研究采用纳米材料构建金黄色葡萄球菌新型免疫检测方法,所制备的Ig Y-Au NP-ALP粒径均一,分散性良好,直径约20±2nm,紫外光谱在526 nm处有特征吸收峰,红外光谱呈现-CH2-、C=O等特征峰,表面电位为-5.7±1.2 m V,具有催化AAP产生显色反应的酶活性。非特异性磁珠呈球状,平均粒径为14±3 nm,具有良好的超顺磁性。金纳米棒呈现分散性良好的棒状结构,纵向长度约为45 nm,横向直径约为10 nm,溶液呈现为粉红色,横向及纵向最大吸收峰位于520 nm和764 nm处。4.经实验条件优化,Ig Y-Au NP-ALP的最佳p H值为9.5、Ig Y-Au NP-ALP与磁性复合物的共孵育时间为30 min、ALP的酶作用时间为30 min,AAP浓度为20 m M。5.所建立方法的肉眼检测限为10~3CFU/m L,利用紫外光谱定量分析检测限可达7 CFU/m L。对干扰菌的检测证明该方法具有较好的特异性。本方法对牛奶模拟样品中的金黄色葡萄球菌检测的回收率为97.3%～102.1%。与国标平板法相比,该方法的灵敏度为100%,特异度为80%,Kappa值为0.865。Passing-Bablok回归、Bland-Altman差异图结果表明本方法与国标平板法具有良好的一致性,在实际应用中抗干扰能力较强。结论:1.采用Meta分析的方法,通过计算合并灵敏度等效应量证实了现有PCR方法、显色培养基、免疫学检测技术三类检测方法在金黄色葡萄球菌鉴别诊断方面均具有较好的诊断价值,其中免疫检测技术具有最佳诊断价值,显色培养基在鼻拭子和MRSA检测方面较PCR具有更高的诊断价值。经Meta回归和亚组分析推测样本来源、循环阈值、检测基因等为PCR诊断价值的影响因素,样本来源、孵育时间等为显色培养基诊断价值的影响因素。2.以非特异性磁珠、双标记金纳米探针、金纳米棒三种纳米材料构建的免疫比色检测方法在金黄色葡萄球菌检测方面具有较低的检测限和良好的特异性,在食品样品检测中具有良好的抗干扰能力,与国标平板法具有良好的一致性,适用于筛查和现场检测。