目的 构建可被放射线激活而转录的早期生长反应因子-1（Egr-1）启动子驱动的双自杀基因CDTK重组真核表达载体（pcDNA3.1-CMV-Egr-1-CDTK）；将其转染人宫颈癌细胞株Hela细胞，在⁶⁰C_O-γ射线照射后，研究其在宫颈癌细胞中的表达及在前体药物5-FU和GCV作用下体外对宫颈癌细胞的杀伤作用及旁观者效用；同时将转染了重组真核表达载体（pcDNA3.1-CMV-Egr-1-CDTK）的人宫颈癌细胞种植于Balb／c裸鼠皮下，建立裸鼠宫颈癌种植瘤模型，研究放射线诱导性自杀基因在射线作用下对体内宫颈癌的治疗作用。 方法 利用PCR扩增CD，TK基因，并将其构建成融合基因，连至pc DNA3.1质粒载体上，从家鼠基因组中扩增Egr-1启动子序列，并扩增CMV增强子插入Egr-1启动子构建成真核表达载体pcDNA3.1-CMV-Egr-1-CDTK。体外培养人宫颈癌细胞株Hela细胞，将真核表达载体pcDNA3.1-CMV-Egr-1-CDTK通过电转染方法转染人宫颈癌细胞hela细胞株，经放射线⁶⁰CO-γ照射并给予前体药物，通过RT-PCR，Western等方法检测转染细胞中融合基因CDTK的表达情况，MTT法检测细胞存活比率来评价我们构建的肿瘤自杀基因载体对Hela细胞的杀伤效应和旁观者效应以及对放射治疗的增敏性。将转染肿瘤自杀基因载体阳性的Hela细胞进行裸鼠体内致瘤，了解致瘤特性，在前体药物和放射线⁶⁰C_O-γ照射的不同组合治疗条件下，测量肿瘤大小，进行肿瘤组织病理切片检查，同时RT-PCR检测肿瘤组织内CDTK扩增片段。 结果 真核表达载体质粒经酶切和测序鉴定证明其方向正确。真核表达载体质粒转染Hela细胞，筛选后得到表达CDTK基因的Hela／CDTK细胞，RT-PCR显示长度为400bp的阳性条带，Western杂交技术检测结果可见一59KD大小的蛋白质，与CDTK基因序列分析的预期大小一致，证明该载体在Hela细胞能被转录和翻译成CDTK融合蛋白。MTT检测发现，转染pcDNA3.1-CMV-Egr-1-CDTK的细胞对放射线⁶⁰C_O-γ照射的敏感性明显增强。分组动物试验时，治疗前五组动物瘤体大小无差异，治疗的最后一天，阳性细胞瘤+前体药物+放射组肿瘤体积最小，与阳性细胞瘤+放射组肿瘤有显著性差异（P＜0.05），与阳性细胞瘤+PBS组肿瘤有极显著性差异（P＜0.01）。转染阳性细胞组病理检查细胞有大量坏死和溶解，对照组则可见细胞排列紧密未