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目的:研究齐墩果酸(OleanolicAcid,以下简称OA)对白血病细胞株K562凋亡相关基因表达的影响。
方法:本实验以K562细胞为研究对象,801μmol/L齐墩果酸为处理因素,采用光学显微镜观察细胞形态的变化、运用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测凋亡相关基因bcl-2、bax、bcl-xL、bid、c-myc、fas、fasl、faddmRNA表达水平的变化。
结果:
1.与空白组和DMSO对照组比较,80μmol/LOA作用K562细胞后,细胞生长受到抑制,增殖能力减弱,且有时间依赖性。细胞表现为:形状不规则,部分出现膜皱缩、凋亡小体等凋亡标志,而对照组细胞大小均一,无明显的增殖抑制和形态学变化。
2.与空白组和DMSO对照组比较,80μmol/LOA作用于K562细胞随作用时间的增长,可显著上调其bax/bcl-2表达的比值,其中以促进bax的表达为主,而抑制bcl-2的表达则相对较弱。3.与空白组和DMSO对照组比较,801μmol/LOA作用K562细胞后,fas基因mRNA表达高于对照组,而fasl、fadd基因mRNA未见表达。4.与空白组和DMSO对照组比较,80μmol/LOA作用K562细胞随作用时间的延长c=myc、bcl-xLmRNA的表达量显著下调。5.与空白组和DMSO对照组比较80μmol/LOA作用K562细胞,随作用时间的延长bid基因mRNA的表达量显著上调。
结论:齐墩果酸在体外具有抑制白血病K562细胞增殖的作用,并呈现时间依赖性。在其诱导白血病细胞凋亡的过程中,齐墩果酸可能是通过上调bax、bid、fas基因mRNA的表达,下调bcl-2、c-myc、bcl-xL基因mRNA的表达而发挥抗肿瘤作用的,而fasl、faddmRNA是否参与凋亡传导通路,有待于进一步研究。