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随着栽培条件的不断优化和市场需求,平菇[Pleurotus ostreatus（Jacq.）Quél.]成为全球商业化菌菇市场中排名第二的大型食用菌。平菇多糖是平菇中的主要活性成分,已被发现具有免疫调节、抗肿瘤、抗氧化等生物活性。近几年,研究学者发现食用菌多糖具有良好的抗疲劳活性。已有大量研究表明,氧化应激可引起机体疲劳,抗氧化是缓解疲劳的主要方式之一。因此,本试验将对两种不同产地平菇多糖的不同组分进行结构表征;通过体外自由基清除实验筛选抗氧化活性较强组分;从体内和细胞水平共同验证平菇多糖通过调节抗氧化途径实现其抗疲劳作用。采用破壁法提取得到平菇子实体粗多糖POPH和POPS,经DEAE-52纤维素柱层析分离纯化,得到POPH-1、POPH-2、POPS-1和POPS-2四个多糖组分。利用高效凝胶渗透色谱法（high performance gel permeation chromatography,HPGPC）、离子色谱法（ion chromatography,IC）、红外光谱（fourier transform infared spectrometer,FTIR）及扫描电镜（scanning electron microscope,SEM）对纯化后的平菇多糖进行了结构表征,并对比了4组分多糖的自由基清除能力;构建H2O2诱导的氧化应激损伤的L6细胞模型,通过检测细胞活力、抗氧化酶活性、MDA和ROS表达量评估其基于抗氧化的保护细胞作用;通过小鼠负重游泳实验及相关生化指标检测评价平菇多糖的抗疲劳活性。主要结果如下:（1）POPH和POPS的得率分别为4.3%和6.6%,通过分离纯化得到4个组分多糖POPH-1、POPH-2、POPS-1和POPS-2的分子量分别为:5.12×105Da、3.98×105Da、4.78×105Da和3.84×105Da;4个组分多糖均为以葡萄糖为主的复杂水溶性多糖,且纯度较高;POPH-2和POPS-2均为吡喃糖;POPH-2和POPS-2均存在α型糖苷键;POPH-2表观形态为不规则碎片状、表面光滑且含有较多孔洞。（2）POPH-2和POPS-2抗氧化能力较强,其中POPH-2浓度在0.5-5mg/m L时,对DPPH和ABTS自由基的清除率最大可分别达到71.6%和92.2%。POPH-2通过降低细胞内丙二醛（maleic dialdehyde,MDA）（P<0.01）和活性氧（reactive oxygen species,ROS）（P<0.01）含量以及提高超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）（P<0.05）和谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxide dismutase,GSH-Px）（P<0.05）等抗氧化酶活性来保护由H2O2诱导氧化损伤的L6细胞。（3）POPH-2（200 mg/kg bw·d）可显著提高小鼠负重游泳时间（P<0.01）,通过降低小鼠血清中尿素氮（blood urea nitrogen,BUN）（P<0.05）、乳酸脱氢酶（lactic dehydrogenase,LDH）（P<0.05）和乳酸（lactic acid,LA）（P<0.05）含量以及肌肉组织中LA（P<0.05）含量,减缓肝糖原（hepatic glycogen,HG）（P<0.05）消耗,降低肝脏和血清中ROS（P<0.05）表达量并提高血清中SOD（P<0.01）和肝脏中GSH-Px（P<0.01）的酶活性来缓解小鼠机体疲劳。综上所述,本研究对分离纯化得到的4个组分多糖进行结构表征,通过体外自由基清除实验和细胞水平抗氧化能力筛选出POPH-2作为有效实验材料,初步从抗氧化水平探究平菇多糖抗疲劳活性,为平菇多糖的合理开发及抗疲劳研究提供依据和思路。