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目的:环境内分泌干扰物邻苯二甲酸二(2-乙己基)酯(Di-2-ethylhexylphosphate,DEHP)及氟他胺(Flutamide,Flu)构建隐睾模型和未成熟睾丸损伤模型,探究内分泌干扰物暴露致睾丸发育异常和功能障碍的分子机制,并探讨自噬信号通路在其中的作用。方法:第一部分:Sprague-Dawley rat(SD)孕鼠随机分为3组:第一组:不予任何处理作为对照组,Ⅱ组:孕11-19天予以Flu 25mg/kg/bw/d注射,III组:孕7-19天予以DEHP 750 mg/kg/bw/d灌胃。筛选隐睾模型后代并采集睾丸,通过分析凋亡相关蛋白Fas,细胞色素C和caspase-3以及自噬信号通路中关键信号分子LC3I/II、p62、Beclin-1的表达情况,探讨凋亡和自噬信号通路在内分泌干扰物孕期暴露诱导隐睾所致的睾丸损伤中的作用。第二部分:SD大鼠于生后(postnatal day,PND)1-35天分别予以0、250、500 mg/kg DEHP灌胃,于PND35天取睾丸组织,探究LC3I/II、p62、Beclin-1以及睾丸血睾屏障连接蛋白β-catenin、Cx43、ZO-1的表达情况,并对相关氧化应激损伤指标以及PI3K、p-Akt、Akt、p-mTOR、mTOR进行检测。探讨自噬信号通路在环境内分泌干扰物生后暴露诱导的未成熟睾丸损伤中的作用。结果:第一部分:环境内分泌干扰物孕期暴露诱导隐睾的发生,隐睾显著地降低了精子数量(正常组:Flu诱导隐睾组:DEHP诱导隐睾组=70.42±12.09×106/mL:23.33±6.88×106/mL:28.82±4.49×106/mL)、增加精子畸形率(正常组:Flu诱导隐睾组:DEHP诱导隐睾组=2.30±0.53%:6.05±0.15%:6.55±0.10%),降低睾酮水平(正常组:Flu诱导隐睾组:DEHP诱导隐睾组=19.26±2.56nmol/L:8.84±2.61nmol/L:7.46±3.52nmol/L)、破坏雄性生育能力并导致严重的睾丸损伤。DEHP诱导隐睾模型组和氟他胺诱导隐睾模型组睾丸组织内凋亡标记蛋白Fas、细胞色素C和caspase-3的表达水平上调(P<0.05)。DEHP诱导隐睾发生的同时细胞自噬体数量和自噬标志物LC3-II和p62的水平增加(P<0.05);但Flu诱导隐睾组中的自噬相关基因(LC3-II和p62)表达水平明显降低(P<0.05)。第二部分:生后未成熟期DEHP暴露导致睾丸脏器系数降低(正常组:低剂量DEHP组:高剂量DEHP组=0.00551±0.00095:0.00358±0.00075:0.00258±0.00052),睾丸组织学形态结构破坏明显,睾丸连接蛋白β-catenin、Cx43、ZO-1表达下调(P<0.05)。血红素氧合酶-1(Heme Oxygenase-1,HO-1)和超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)水平显著降低(P<0.05)。PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR表达水平下调(P<0.05)。同时,维生素E和维生素C可以缓解环境内分泌干扰物DEHP诱导的氧化应激失衡,反向调控自噬水平并恢复血睾屏障相关连接蛋白的表达。结论:自噬和凋亡的异常表达参与了环境内分泌干扰物孕期暴露诱导隐睾所致的生精功能损伤。生后DEHP暴露也通过ROSPI3K/Akt/mTOR介导的自噬异常破坏睾丸血睾屏障完整性,进一步影响生精微环境,导致雄性生殖功能障碍。并且这种自噬作用更多表现在自噬降解的缺陷。