脐橙脱囊衣菌株选育及其所产果胶酶酶学特性研究

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随着脐橙资源的不断开发利用,脐橙加工制品越来越受到人们的喜爱。在脐橙生产加工过程中,脱囊衣是影响产品质量和生产效率的关键环节。脱囊衣过程中主要是采用酸碱或者酶制剂对囊衣起到脱除作用,与酶法脱囊衣相比,传统酸碱脱囊衣工艺存在工人需求量大、生产效率不高、产品质量不稳定等问题。在利用生物酶法降解脐橙囊衣的过程中,其中果胶酶的生产至关重要,目前果胶酶主要来源于微生物的大规模发酵生产。本研究从土样中筛选获得一株脐橙囊衣降解微生物Y-6-4,对其种属关系进行了相应鉴定后,优化了其培养基成分和发酵条件,并分析了其产生的果胶酶的酶学性质,结果如下:1、从脐橙果园土壤样品中筛选果胶酶产生菌,经过富集培养、初筛和复筛得到一株命名为Y-6-4的果胶酶产生菌,其产酶活力为169.53 U/mL。结合形态学及分子生物学鉴定方法,鉴定该菌株Y-6-4为白地霉(Galactomyces Citri-aurantii)菌属。将该白地霉菌株进行了保藏,保藏中心登记入册编号为:CGMCC No 10771。2、通过对菌株Y-6-4的发酵条件进行单因素试验和正交试验,菌株产酶条件得到优化。该菌株发酵产酶最佳培养基条件为:囊衣粉1.00%,NH4NO3 0.60%,K2HPO4 0.10%,KH2PO4 0.10%,FeSO4 0.005%,MgSO4 0.06%,ZnSO4 0.04%。最佳发酵条件为:发酵温度为32℃,发酵时间72 h,接种量为2×108个/L,初始pH为5,该条件下酶活力高达432.29 U/mL。3、对酶学性质进行了研究。结果表明,菌株Y-6-4所产生的果胶酶最适作用pH值为5,且在pH 4.07.0的环境中酶活力稳定,有助于在食品等行业中的推广应用。另一方面,菌株Y-6-4产生的果胶酶最适作用温度为50℃,温度稳定性表明,温度对酶活力的影响需要时间的积累,Y-6-4菌株发酵液中提取的果胶酶粗酶液在4℃50℃时,酶活相对稳定。为脐橙生物酶法清洁加工工艺的实际应用提供了理论支持。4将自制果胶酶与商品酶脱囊衣效果进行比较,测得自制果胶酶酶活为456.09U/mL,商品酶酶活为503.57 U/mL,控制其他变量一致,2.5 h均可将脐橙囊衣脱除完全,酶降解效果好,研究结果可用于脐橙生物酶法清洁加工,有利于降低成本和改善产品质量。
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