论文部分内容阅读
第一部分高尔基体糖蛋白73在原发性肝癌中的表达及与临床预后因素的关系目的:高尔基体糖蛋白73(GP73)是新近热点研究的一种肝癌肿瘤标志物,但其临床应用推广仍有诸多限制。目前研究多数停留在血清GP73与AFP检测敏感性的对比方面,强调其作为肿瘤标志物的价值,而组织中的GP73表达情况也多从免疫组化水平方面进行阐述,肝癌组织及正常对照肝脏组织中GP73蛋白及mRNA水平的表达情况及其与临床特征、预后等因素的相关性研究报道较少,GP73在肝癌发生发展中的机制及临床特征我们更是了解甚少,本研究旨在探讨原发性肝癌组织中GP73的表达水平及其对肝癌诊断的价值。方法:应用RT-PCR及Western-Blot方法检测手术切除的65例肝癌组织、相应近癌旁(肿瘤边缘≤1 cm)、远癌旁(>1 cm)癌旁组织及26例正常肝组织的mRNA及蛋白水平,并分析与临床特征及预后的关系,探索其在肝癌诊断中的价值。结果:与癌旁组织和正常肝组织相比,肝癌组织中的GP73 mRNA及蛋白表达水平均明显升高,且GP73mRNA比较(2.64±0.11 vs.1.01±0.07,0.65±0.03),蛋白表达之间[8.56(6.31-14.26)vs.3.76(2.35-6.12)vs.1.43(1.08-2.43)],有显著性差异(P<0.001)。GP73mRNA的高表达与肿瘤大小、血管侵犯及肿瘤分级密切相关,蛋白表达同样与血管侵犯、肿瘤分级密切相关,且发现与有无复发密切相关。生存分析显示癌组织GP73mRNA低表达组患者预后较之高表达组患者预后好,有无血管侵犯及GP73蛋白表达量是影响患者生存期的独立危险因素。小结:GP73 mRNA及蛋白在肝癌组织中高表达,并与肝癌进展行为关系密切,深入研究可以帮助了解GP73在肝癌预后中的价值。第二部分GP73在原发性肝癌患者血清中的诊断价值及在介入治疗中的评估意义目的:观察原发性肝癌患者TACE治疗前后血清高尔基体糖蛋白73动态表达及联合AFP检测的临床意义。方法:2014年8月-2017年9月在河北医科大学第四医院介入病房首次住院治疗的原发性肝癌患者68例,男性45例,女性23例,年龄39~78岁,平均53.2岁。采用Seldinger法穿刺右股动脉然后导管超选择进入靶血管内,为进行精细治疗并避免过度损伤正常肝脏组织,患者需借助Progreat或Stride微导管进行肿瘤靶血管的选择。根据患者术前肝功能情况缓慢灌注替加氟1000mg,洛铂50mg,亚叶酸钙200mg,然后以8-15ml超液化碘油中加入阿霉素20mg混合成乳剂来栓塞肿瘤供血动脉,再应用栓塞微粒球加强栓塞至肿瘤染色完全消失。所有患者行锥形束CT寻找肿瘤供血血管及评估介入术后栓塞效果。酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测29例正常人、43例肝硬化患者以及68例肝癌患者血清GP73水平,并比较患者介入前2天、介入后7天及30天的血清GP73水平。分析原发性肝癌组、肝硬化组及正常健康人群组的血清GP73水平,应用SPSS软件绘制受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线。结果:68例肝癌患者、43例肝硬化患者和29例正常对照组血清GP73水平分别为152.5(76.4-284.5)、75.9(43.2-96.5)及49.3(12.6-76.7)ng/ml,两两比较组间差异有统计学意义(P<0.01)。血清GP73水平与肝癌患者临床分期明显相关;原发性肝癌患者BCLC分期A、B、C期血清GP73表达水平分别为92.12(38.9-135.2)、122.9(55.2-178.5)、162.55(110.8-232.9)ng/ml,两两比较差异有统计学意义(P<0.05);介入治疗后7天肝癌患者血清GP73水平为99.2(66.7-150.8)明显低于介入治疗前,差异有统计学意义(P<0.05)。在血清AFP<400ng/mL原发性肝癌介入患者中,19例(76.0%)患者的GP73血清表达水平高于临界值,表明GP73在AFP阴性的肝癌患者中有较好的诊断价值。以所有肝癌患者的血清GP73及AFP表达水平绘制受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线,以推荐的最佳水平97.3ng/m L作为截断值时,血清GP73诊断肝癌的灵敏度和特异度分别为85.3%和89.7%,AFP诊断肝癌截断值为200ng/mL时,对肝癌诊断的敏感度和特异度分别为54.4%和82.4%。GP73诊断肝癌的敏感度显著高于AFP(P<0.001),而特异性两组无明显差异。GP73和AFP的ROC曲线下面积(area under receiveroperating characteristic curve,AUROC)分别为0.925和0.761(P<0.001),差异具有统计学意义。根据mRECIST标准评估介入疗效,CR13例,PR27例,PD16例,SD12例。TACE进展组(PD+SD)与TACE有效组(CR+PR)间血清GP73浓度水平有统计学差异[179.3(93.2-283.4)vs135.6(63.5-235.2),P<0.05],两组间AFP浓度无明显统计学差异。小结:高尔基体糖蛋白-73在原发性肝癌介入患者血清学的诊断中,有着较高的灵敏性与特异性,同时有助于肝癌介入疗效的评估及指导介入治疗策略。第三部分锥形束CT(CBCT)在原发性肝癌介入治疗的应用价值目的:评价DynaCT技术在肝癌介入治疗中的应用价值及疗效,为临床合理应用DynaCT提供依据。方法:将89例原发性肝癌患者随机分为DynaCT组与常规DSA组,DynaCT组46例,常规DSA组43例,DynaCT组为二维常规DSA联合增强DynaCt检查。对两组的手术操作时间、X线辐射量及造影剂用量进行对比分析;同时对DynaCT检出病灶数量和明确血管走行的能力与常规DSA及螺旋CT进行对比,并随访两组患者,针对总生存期进行对比分析。结果:与常规DSA组相比,DynaCT组缩短了手术时间,差异有统计学意义(P<0.05);两组间X线辐射量间无统计学意义,而两组间造影剂用量差异具有统计学意义,DynaCT组较常规DSA组减少了造影剂用量,说明术中加做DynaCT检查并未增加X线辐射量和造影剂用量。DynaCT组共检测病灶92个(46例患者),在直径<10mm及10mm-20mm直径的小肝癌中,DynaCT的诊断敏感率明显优于常规CT及螺旋CT,差异具有统计学意义(P<0.001);直径>20mm肝癌中三种检查方法均能明确诊断,不具有统计学差异。Dyna CT组内46例患者中共有11例行常规DSA后发现肿瘤供血动脉因二维DSA原因,不能分辨肿瘤供血动脉具体起点及走行,行增强锥形束CT后,其中9例肿瘤供血动脉分支起点及分支走行显影清晰,超选择插管后诊断明确。二者差异有统计学意义。DynaCT组总生存期为17.3±1.1月,常规DSA组总生存期为12.6±0.9月,经Log-Rank检验,P=0.003,差异具有统计学意义。小结:常规DSA基础上应用DynaCT在原发性肝癌介入化疗栓塞中具有重要的临床应用价值,提供更多诊断治疗信息,改善患者预后。结论:1.与相应的癌旁组织及正常肝组织相比,原发性肝癌组织标本中GP73的蛋白及m RNA表达水平明显升高,很好地反映了GP73在肝癌检测中的价值;并且其表达水平与反映肿瘤侵袭生长特性的血管侵犯、病理分级等指标相关,代表其与肝癌的生长、侵袭及复发等生物学行为有着潜在的相关性。2.GP73在原发性肝癌患者介入疗程中的动态变化可反映TACE疗效,可为原发性肝癌患者介入后选择治疗时机提供依据,并且比AFP有更好的灵敏性与特异性。3.锥形束CT有助于发现早期病灶,明确肿瘤的血供来源,实时评估介入术后疗效,有助于介入治疗方案的制定与规范,提高患者疗效及生存期。