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目的 探究miR-19b和JAK/STAT3信号通路在由IgE介导的过敏性结膜炎模型中的表达变化;探究阻断JAK/STAT3信号通路后,在小鼠过敏性结膜炎的眼表炎症中的变化;探究miR-19b在TSLP介导的过敏性炎症及对JAK/STAT3信号通路的影响。方法1.选择BalB/c雌性小鼠30只,随机分为正常对照组(PBS)、过敏性结膜炎组(Allergic conjunctivitis,AC)、CYT387(JAK/STAT3通路阻断剂)注射过敏性结膜炎组(AC+CYT387)、miR-19b agomir注射过敏性结膜炎组(AC+miR-19b)、agomir阴性对照过敏性结膜炎组(AC+control miR),每组6只小鼠。2.采用结膜炎眼表临床评分的方法评估小鼠结膜炎的严重程度,采用HE染色的方法检测小鼠角结膜下炎性细胞及嗜酸性粒细胞的浸润情况,采用ELISA的方法检测小鼠血清IgE水平,免疫荧光双染的方法分别检测小鼠眼表TSLP和p-STAT3在结膜树突细胞中的表达情况,采用RT-qPCR的方法分别观察小鼠角膜、结膜、淋巴结组织中miRNA-19b、TSLP及IL-1、IL-5、IL-6、IL-13等炎症相关因子的基因水平变化。结果1.临床评分显示,相比于正常对照组,AC组小鼠眼表炎症程度明显严重。JAK/STAT抑制剂或miR-19b的过表达也能减轻AC症状和炎症评分,而miR注射液的阴性对照组与AC组的结果相似。2.HE染色显示,AC组眼表炎症细胞和嗜酸性粒细胞浸润水平较正常对照组均明显升高且差异有显著性(P<0.0001),而在AC+miR-19b组和AC+CYT387组分别较AC组炎症细胞和嗜酸性粒细胞浸润水平均明显下降且差异均具有显著性(P均<0.001)。AC组与AC+control miR组相比较没有明显差异。3.ELISA显示小鼠血清IgE的表达水平在过敏性结膜炎模型组较正常对照组明显升高且差异有显著性(P<0.01),AC+CYT387组与AC+miR-19b组分别较AC组血清IgE的表达水平均有明显下降且差异均具有显著性(P均<0.05)。AC组与AC+control miR组相较没有明显差异。4.免疫荧光双染色的结果显示,在注射miR-19b agomir后,较AC组中,TSLP和磷酸化的STAT3(p-STAT3)总体表达和在树突细胞中的表达均可见明显减少。AC+CYT387组较AC组TSLP和树突细胞的表达均可见明显减少。5.RT-qPCR显示:AC组较正常对照组,miR-19b的表达有显著下降,并在注射miR-19b agomir后,在小鼠结膜、角膜、淋巴结组织中,miR-19b的表达均有明显升高(P<0.001)。炎性相关因子,TSLP、IL-1、IL-5、IL-13等的表达水平均在miR-19b过表达或阻滞JAK/STAT通路后明显下降且差异有显著性(P<0.5)。结论1.在过敏性结膜炎模型中,miR-19b的表达降低,树突细胞中JAK/STAT信号通路的表达和磷酸化程度均显著增高。通过抑制JAK/STAT信号通路或过表达miR-19b均可导致过敏性结膜炎表型抑制及炎症反应减弱。2.过敏性结膜炎诱导的结膜、角膜和颈部淋巴结组织中TSLP的表达可被miR-19b的过表达显著阻断。在TSLP被阻断的同时,下游JAK/STAT信号通路的磷酸化受到了阻滞。3.通过抑制JAK/STAT通路或过表达miR-19b可降低树突细胞成熟和Th2炎症反应的表达进而影响过敏性结膜炎的发生和发展。