加味桂芍知母汤治疗大鼠佐剂性关节炎的实验研究

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目的:通过实验,观察加味桂芍知母汤对大鼠佐剂性关节炎(adjuvant arthritis,AA)的治疗作用,从细胞因子角度初步探讨其作用机制,并比较分析加味方与原方在IFN-γ、IL-10水平的差异,为临床使用加味方治疗类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)提供实验依据。材料与方法:40只SPF级Wistar雌性大鼠适应性饲养7天后,按体重随机均等分为正常组、模型组、对照组、原方组(桂芍知母汤组)、加味组(加味桂芍知母汤组),每组8只。除正常组,其余各组用完全弗氏佐剂(complete Freund’s adjuvant,CFA)制成AA大鼠模型。造模一周确认模型复制成功后,除正常组,其余各组采用灌胃的方式给予相应的煎剂,对照组给予等量的蒸馏水,给药时间为3周。实验期间,观察各组大鼠的一般状态,测量记录体重、食量、水量,计算关节炎指数(Arthritis Index,AI),分别在实验第1d、8d、15d、22d、29d测量大鼠足掌肿胀度。实验29d,将大鼠处死,取各组大鼠踝关节做病理切片,取脾脏测脾脏系数,取后足掌软组织用ELISA法测INF-γ及IL-10含量,记录结果并使用SPSS18.0进行数据统计分析。结果:1.加味组大鼠用药后,一般状态如食水量、足爪形态、皮毛光泽度、活动能力、精神状态等较模型组大鼠均有显著改善;2.加味桂芍知母汤能显著降低AA大鼠的足爪肿胀度、AI及脾脏系数,加味组大鼠足爪肿胀度、AI、脾脏系数均显著低于模型组(P<0.05),足爪肿胀度、AI显著低于原方组(P<0.05);3.病理切片显示,模型组可见大量炎性细胞浸润、滑膜细胞增生,滑膜组织增厚,血管翳形成,可见大量软骨细胞增生;加味组只有少量炎性细胞浸润,少量滑膜细胞增生,滑膜组织基本正常,未见血管翳形成;4.加味组大鼠足爪组织中促炎性因子IFN-γ含量明显低于模型组(P<0.05),亦明显低于原方组(P<0.05);抑炎性因子IL-10含量明显高于模型组(P<0.05),亦明显高于原方组(P<0.05)。结论:1.加味桂芍知母汤具有确切的抗炎作用,能够改善AA大鼠的一般状态,缓解关节炎症;能够抑制炎性细胞浸润,减少关节滑膜细胞增生,减少血管翳的生成而对关节起到保护作用。2.加味桂芍知母汤可能通过抑制促炎性因子IFN-γ表达并促进抑炎性因子IL-10的表达,调节细胞因子网络趋于平衡,改善免疫机能,而起到治疗RA的作用;加味桂芍知母汤在下调促炎性因子IFN-γ表达、上调抑炎性因子IL-10的表达方面效果优于原方。3.藤类药可以通经活络、舒筋通脉、祛风除湿,能够协助桂芍知母汤更好地发挥抗炎作用,加味藤类药是对原方的有益补充。
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