【摘 要】
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胶原蛋白是猪骨中含量较高,活性较为重要的一种蛋白质。猪骨胶原多肽是猪骨粉经酶解后形成一系列分子量不均一的多肽混合物。本文对猪骨胶原蛋白酶解制备成多肽及其功能特性
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胶原蛋白是猪骨中含量较高,活性较为重要的一种蛋白质。猪骨胶原多肽是猪骨粉经酶解后形成一系列分子量不均一的多肽混合物。本文对猪骨胶原蛋白酶解制备成多肽及其功能特性进行研究,得到以下主要研究结果:1、以猪骨为原料,选择Protamex复合蛋白酶酶解猪骨中的胶原蛋白为多肽,确定最佳水解工艺条件为:酶用量0.40,水解时间12小时,pH值7,温度50℃。经检测自制猪骨胶原多肽的蛋白质为56.45%、脂肪为0.01%、钙为1036.41mg/kg、磷为496.7mg/kg。2、选择Sprague-Dawley(SD)雌性大白鼠,用切除大鼠卵巢的方法复制骨质疏松(OP)模型,基线组为无任何干预的空白对照组,骨三维结构CT扫描与SHAM假手术组对照确认切除大鼠卵巢为OVX骨质疏松模型。实验大鼠分为5组:OVX生理盐水干预组、OVX自制猪骨胶原多肽干预组、OVX碳酸钙干预组、OVX葡萄糖酸钙干预组、SHAM假手术组。经对比干预12周后发现,自制猪骨胶原多肽对大鼠骨密度有所改善,但不具有统计学意义。对骨质疏松大鼠血清学指标和骨生物力学指标有显著性的影响,具统计学意义。3、通过凝胶排阻洗脱分级自制猪骨胶原多肽,SDS-PAGE电泳分离确认洗脱后每级的分子量大小,并将每级用于干预从大鼠颅骨中取得的成骨细胞,MTT法对比检测结果显示:E级组分,其分子量范围为2-8千,对成骨细胞增殖效果最佳。经分析其氨基酸组成类似Ⅰ型胶原蛋白组成特点。
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