【摘 要】
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目的本研究旨在从C57BL/6小鼠骨髓细胞中分离间充质干细胞（MSCs）及淋巴内皮祖细胞（LEPCs）,对其培养及鉴定,并探讨MSCs对LEPCs迁移能力的影响。方法1.选择C57BL/6小鼠的长骨（股骨和胫骨）进行MSCs提取,采用贴壁培养方法抽取细胞来培养及传代。2.利用流式细胞仪对Sca-1+、CD29+、CD45-、CD11b-的细胞进行检测,所得即MSCs,培养获得目标细胞。3.对上述实
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目的本研究旨在从C57BL/6小鼠骨髓细胞中分离间充质干细胞（MSCs）及淋巴内皮祖细胞（LEPCs）,对其培养及鉴定,并探讨MSCs对LEPCs迁移能力的影响。方法1.选择C57BL/6小鼠的长骨（股骨和胫骨）进行MSCs提取,采用贴壁培养方法抽取细胞来培养及传代。2.利用流式细胞仪对Sca-1+、CD29+、CD45-、CD11b-的细胞进行检测,所得即MSCs,培养获得目标细胞。3.对上述实验中的MSCs进行多项分化能力（包括骨分化、软骨分化及脂肪分化）的鉴定。4.选择C57BL/6小鼠的长骨（股骨和胫骨）进行LEPCs提取,采用贴壁培养方法抽取细胞来培养及传代。5.流式细胞仪对CD34+、CD133+、VEGFR-3+的细胞分别进行检测,即得到LEPCs,培养获得目标细胞。6.成管实验对LEPCs进行功能鉴定。7.按1:1的比例取第3代MSCs和LEPCs,分别进行划痕实验和Transwell迁移实验来观察MSCs对LEPCs迁移能力的影响。结果1.通过贴壁培养法,从C57BL/6小鼠长骨中（股骨和胫骨）能够成功提取出足够数量的MSCs,显微镜下为集落样生长,细胞形态均匀,呈纺锤状形态。2.流式细胞仪对第3代MSCs表型检测示,Sca-1、CD29阳性和CD45、CD11b为阴性。3.MSCs有能力分化为成骨细胞、软骨细胞和脂肪细胞。4.通过贴壁培养成功从C57BL/6小鼠股骨和胫骨中提取出LEPCs。5.流式细胞仪对第3代LEPCs进行表型检测示,CD34、CD133、VEGFR-3均为阳性。6.Transwell迁移实验与细胞划痕实验示,MSCs与LEPCs共培养细胞的迁移率实验组明显高于对照组（P=0.04）。结论1.MSCs与LEPCs可成功地从小鼠股骨和胫骨骨髓中分离,易于体外培养和传代且保持稳定的细胞生物学特性。2.MSCs可以促进LEPCs的迁移能力。
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