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第一部分MPTP所致小鼠帕金森病模型的建立目的：MPTP是一种能引起神经系统退行性病变的化学毒素，是目前广泛应用制作动物PD模型的工具药。本实验旨在观察MPTP所致的小鼠帕金森病模型的行为学变化以及多巴胺能神经元损伤。方法：C57/BL6小鼠腹腔注射MPTP（30mg/kg），连续5d，制备帕金森病模型。另有LiCl（1mEq/kg）预处理7d后再给予MPTP组，及空白对照组。观察造模前1d、造模过程1~5d、造模后1~7d、14d和21d小鼠行为学的变化。造模后第7d采用免疫组织化学法检测各组黑质多巴胺能神经元的损伤情况。结果：①给予MPTP后5~15min，小鼠均出现震颤、竖毛、竖尾等急性应激反应。爬杆行为学检测显示，给予MPTP后，小鼠爬杆时间明显延长，差异显著。停止给药后，出现一定程度的恢复，爬杆时间逐渐缩短，但始终高于空白对照组。LiCl预处理对小鼠爬杆行为障碍具有一定程度的改善作用。②与空白对照组相比，MPTP组黑质致密部TH阳性神经元数量明显减少，LiCl预处理组的TH阳性神经元数量有一定程度增加。结论：在MPTP诱导的小鼠帕金森病亚急性模型中，出现典型的帕金森症状，同时，TH阳性神经元数目明显减少，说明小鼠帕金森病模型制备成功。第二部分经典Wnt信号通路在MPTP诱导的小鼠帕金森病模型中作用研究目的：经典Wnt信号通路在动物的生长发育过程中发挥重要的调控作用，经典Wnt信号通路功能受到抑制会导致神经元损伤。本实验旨在研究经典Wnt信号通路在MPTP诱导的小鼠帕金森病模型中的作用。方法：①C57/BL6小鼠腹腔注射MPTP（30mg/kg），连续5d，制备帕金森病模型。空白对照组给予等量生理盐水。造模后0d(6h)、1d、2d、4d、7d、14d和21d分别取小鼠腹侧中脑、纹状体和大脑皮质，Westernblot检测经典Wnt信号通路蛋白p-Ser9-GSK-3β、GSK-3β、β-catenin在不同时间点的变化情况。②C57/BL6小鼠腹腔注射MPTP（30mg/kg），连续5d，制备帕金森病模型。同时，采用LiCl（1mEq/kg）预处理7d后再给予MPTP组，及空白对照组。Westernblot检测经典Wnt信号通路蛋白p-Ser9-GSK-3β、GSK-3β、β-catenin在腹侧中脑不同时间点的变化情况。结果：在MPTP诱导的小鼠帕金森病模型腹侧中脑区域，检测到经典Wnt信号通路的失活，表现为p-Ser9-GSK-3β和β-catenin表达的降低，且具有一定的时间依赖性，在第7d左右降至最低，随后缓慢恢复。在纹状体和大脑皮质中，经典Wnt信号通路蛋白没有明显变化。MPTP引起的p-Ser9-GSK-3β和β-catenin表达水平的降低均可被LiCl显著升高。结论：在MPTP诱导的帕金森病小鼠腹侧中脑区域，存在经典Wnt信号通路失活。第三部分Dickkopf-1在MPTP诱导的小鼠帕金森病模型中作用研究目的：本实验旨在观察经典Wnt信号通路负性调控因子Dickkopf-1（DKK1）在MPTP诱导的小鼠帕金森病模型中的作用。方法：C57/BL6小鼠腹腔注射MPTP（30mg/kg），连续5d，制备帕金森病模型。另有LiCl（1mEq/kg）预处理7d后再给予MPTP组，及空白对照组。分别于造模后0d(6h)、1d、2d、4d、7d、14d和21d取小鼠腹侧中脑，Westernblot检测DKK1在不同时间点的变化。免疫荧光双标法检测不同组DKK1与TH阳性神经元的共定位表达变化。结果：①DKK1在MPTP诱导的小鼠帕金森病模型腹侧中脑表达显著增多，在第7d达到最大值，随后出现一定程度的恢复，但始终显著高于空白对照组。LiCl预处理对MPTP诱导的DKK1表达增多具有一定抑制作用。②免疫荧光双标结果显示：MPTP损伤后第7d小鼠黑质致密部DKK1表达明显增多，而TH阳性神经元数目显著减少。LiCl预处理能够改善TH阳性神经元数目，抑制DKK1表达。结论：DKK1在MPTP所致的小鼠帕金森病模型腹侧中脑被诱导表达，其可能通过抑制经典Wnt信号通路而促进小鼠帕金森病模型黑质致密部多巴胺能神经元的损伤。