目的:前列腺癌在世界范围内是男性最常见的恶性肿瘤,其发生发展涉及到多种机制。最新研究表明,间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSC）在肿瘤发生发展的过程中能够被招募到肿瘤部位,成为肿瘤微环境的重要组成部分,参与肿瘤的发生发展过程。然而,在前列腺癌的进展过程中,间充质干细胞发挥的作用及具体的机制尚不十分清楚。因此,本研究旨在明确间充质干细胞在前列腺癌进展过程中对前列腺产生的影响及其作用机制。方法:1.首先我们对前列腺癌中与恶性程度相关的基因进行了筛选。通过R包GDCRNATools,我们对TCGA数据库前列腺癌子项目中的52例正常组织样本和495例癌组织样本的RNA测序数据进行了下载和差异表达基因分析,筛选得到癌组织和正常组织之间的差异表达基因,同时,我们对所有癌组织的基因表达谱进行了权重基因共表达网络分析（Weighted correlation network analysis,WGCNA）,找出与Gleason评分最相关的模块,然后,我们对用于差异表达分析的基因进行了生存分析,找出能显著影响患者生存期的基因。最后,我们将差异表达基因、与Gleason评分最相关的模块中的基因以及显著影响患者总生存期的基因取交集,我们从中找出了1个与细胞周期相关的尚未被报道过的基因PKMYT1。2.我们通过免疫组化对PKMYT1在27例前列腺癌和27例前列腺增生组织中的表达进行了检测。通过实时荧光定量PCR和Western Blot对4种前列腺癌细胞LNCa P、C4-2、PC-3及DU 145中PKMYT1的表达量进行了分析,并在表达量最高的PC-3细胞中通过RNA干扰对PKMYT1进行敲低,对敲低后PC-3细胞的增殖、周期、集落形成能力、迁移进行了评估。我们通过蛋白-蛋白互作分析、TCGA数据中基因的表达相关性分析,预测出PKMYT1可能的下游基因,并在敲低PKMYT1后的PC-3细胞中进行了验证。我们还对PKMYT1的抑制剂进行了在线查找和验证。3.我们在LNCa P细胞中对PKMYT1进行敲低,并对其增殖、周期、PKMYT1及下游基因的表达进行检测。通过Transwell将间充质干细胞和LNCa P细胞进行了共培养,对共培养后的LNCa P细胞的增殖、周期、PKMYT1及其下游基因的表达进行检测。同时,我们通过测定增殖能力对共培养前后LNCa P细胞对恩杂鲁胺的敏感性进行了研究。结果:1.经过对TCGA前列腺癌数据进行差异表达基因筛选,我们得到1794个差异表达基因,经过WGCNA分析,我们得到了1个含有367个基因的和Gleason评分最相关的紫色模块,经过生存分析我们得到了687个对前列腺癌患者的总生存期有显著影响的基因,经过对以上3组基因取交集,我们得到了7个基因,其中的PKMYT1是在前列腺癌中尚未被报道过的并且与细胞周期相关的基因。2.免疫组化结果显示PKMYT1在前列腺癌组织中的表达显著高于前列腺增生组织。4种前列腺癌细胞LNCa P、C4-2、PC-3及DU 145中PC-3细胞的PKMYT1表达最高,在PC-3细胞中敲低PKMYT1后,细胞增殖受到显著抑制,G0/G1期细胞的比例显著升高,G2/M期细胞的比例显著降低,集落形成能力减弱,迁移能力减弱。我们预测出了PKMYT1的两个下游基因CCNB1和CCNE1,经验证,敲低PKMYT1后CCNB1和CCNE1的表达降低。我们找到了1个PKMYT1的抑制剂Fostamatinib,并发现它能显著抑制PC-3细胞的增殖。3.在LNCa P细胞中敲低PKMYT1后细胞增殖受到显著抑制,细胞周期改变与PC-3类似,下游CCNB1和CCNE1的表达也降低。与间充质干细胞共培养后,LNCa P细胞增殖受到显著抑制,G0/G1期细胞的比例显著升高,G2/M期细胞的比例显著降低,与敲低PKMYT1的现象类似,并且共培养后PKMYT1和下游CCNB1和CCNE1的表达也降低。用恩杂鲁胺处理细胞结果发现,与间充质干细胞共培养后LNCa P细胞对恩杂鲁胺的敏感性降低。结论:1.PKMYT1是一个能促进前列腺癌恶性进展的基因,它通过促进细胞周期蛋白CCNB1和CCNE1的表达发挥促进细胞增殖的作用。2.PKMYT1的抑制剂Fostamatinib能显著抑制前列腺癌细胞PC-3的增殖。3.与LNCa P细胞共培养时,间充质干细胞通过抑制PKMYT1的表达来发挥对LNCa P细胞的抑制作用。4.间充质干细胞能诱导LNCa P细胞进入休眠状态从而产生对恩杂鲁胺的抵抗。