背景与目的：HCC形成是多阶段、多步骤、多种基因参与HCC的形成，HCC存在抑癌基因失活。P¹⁶抑癌基因编码16KD的蛋白质，抑制cyclinD1与周期素依赖蛋白激酶（cyclin dependent Kinases，CDK4）结合，阻制PRb蛋白磷酸化，从而抑制E2F介异的S期转录活化基因，抑制细胞增殖。P¹⁶是细胞增殖的主要调节子之一。不同肿瘤组织P¹⁶的失活机制各不相同，HCC的P¹⁶基因失活方式主要是P¹⁶基因启动子异常甲基化(简称p¹⁶甲基化)与纯合性缺失。HCC的P¹⁶基因异常率约60％，P¹⁶蛋白的缺失与HCC的分化，转移相关。研究表明肿瘤病人外周血浆或血清中含有游离的肿瘤DNA，并能检测到肿瘤组织中的相关异常基因改变，为微创诊断，监测肿瘤复发提供新方法。HCC复发率高是影响HCC预后的主要问题，早期监测HCC复发利于选择治疗方法。本课题检测HCC患者血浆中P¹⁶甲基化状况及其作为HCC复发分子标记物的价值。 方法：MSP（methylation-specific-PCR）法是目前检测抑癌基因甲基化改变的最佳方法，我们应用MSP法，原位杂交、免疫组织化学法研究P¹⁶基因在35例HCC患者血浆，单个核细胞，肿瘤组织及其癌旁肝炎/肝硬化组织的表达状况。 结果： 1、P¹⁶甲基化阳性率HCC癌组织34％明显高于癌旁肝硬化/慢性肝炎组织11％（P＜0.01），癌组织P¹⁶甲基化率在HCC伴有脉管浸润较不伴有脉管浸润者有高的趋势（54％，23％）（P=0.05）。 2、血浆P¹⁶甲基化阳性的HCC，其相应的癌组织均呈阳性，血浆P¹⁶甲基化阳性检出率为癌组织的50％（6/12）。相反，HCC癌组织P¹⁶甲基化阴性其血浆均不能检出P¹⁶甲基化。 3、HCC癌组织，血浆P¹⁶甲基化阳性在术后一年复发的HCC（64％，36％）均高于术后一年无复发者（14％，5％）（P＜0.05）。 4、P¹⁶ mRNA原位杂交，P¹⁶蛋白免疫组化证实P¹⁶甲基化的肿瘤组织呈现P”帖NA阴性与P”蛋白缺失。 5、外甲基化阳性率在血清AFP呈正常的19例HCC 患者 （AFP＜200fig／l）中为 ZI％（4／19）。 结论： l、HCC血浆中能检出 P”甲基化异常并与 HCC术后复发相关，可能是微创监测HCC术后复发的分子标记物。 2、HCC月瘤组织 P”甲基化与 P‘’mRNA转录抑制，P”蛋白表达缺失密切相关。 3、HCC肿瘤组织P”甲基化可能与HCC浸润转移有关。 4，P‘’甲基化阳性率在血清 AFP呈正常的 HCC患者为 ZI免 检测血浆 P”甲基化可能对 AFP呈正常的肝癌患者有诊断作用。